[发明专利]一种PKEK融合蛋白及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201911075149.5 | 申请日： | 2019-11-06 |
| 公开（公告）号： | CN112759653B | 公开（公告）日： | 2023-06-23 |
| 发明（设计）人： | 刘合栋;曹春来;杨晓纯;杨祺;邹鑫;刘学明;梁雄基;王康钊;肖炳文;黄有泉;周翠;何秀仪 | 申请（专利权）人： | 珠海联邦制药股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C07K5/117;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 裘晖;苏运贞 |
| 地址： | 519040 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 pkek 融合 蛋白 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种PKEK融合蛋白，其特征在于：包括将若干柔性连接肽与美白多肽PKEK依次串联构成的蛋白以及伴侣蛋白，其结构式如下：A-（B-PKEK）n；其中：A为伴侣蛋白、B为柔性连接肽、n为10～30的整数；
所述的柔性连接肽为AK、GK、AAK、AAGK、AAGGK、GGAAK、GGSASK或AAGGSGAGK；
所述的柔性连接肽中的K为蛋白酶酶切位点；
所述的伴侣蛋白为KSI时，所述的柔性连接肽为AK、GK、AAK、AAGK、AAGGK、GGAAK、GGSASK或AAGGSGAGK；
所述的伴侣蛋白为PagP时，所述的柔性连接肽为AK、GK、AAK、AAGK、AAGGK、GGAAK、GGSASK或AAGGSGAGK；
所述的伴侣蛋白为TAF12时，所述的柔性连接肽为AAK或GGAAK；
所述的伴侣蛋白为PaP3.30时，所述的柔性连接肽为AAK或GGAAK。
2.编码权利要求1所述的PKEK融合蛋白的基因。
3.一种重组载体，其特征在于：含有权利要求2所述的基因。
4.一种重组表达菌株，其特征在于，含有权利要求3所述的重组载体。
5.一种利用基因工程技术生产美白多肽PKEK的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、获得包含权利要求2所述的基因的重组载体；
S2、将步骤S1获得的重组载体转入基因工程菌株中，得到重组表达菌株；发酵培养重组表达菌株，收集融合蛋白的包涵体；
S3、溶解、酶切融合蛋白的包涵体，分离纯化即得活性美白多肽PKEK。
6.权利要求5所述利用基因工程技术生产美白多肽PKEK的制备方法在工业化制备美白多肽PKEK中的应用。
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