[发明专利]一种组合物及应用和诊断试剂盒

说明书

本发明涉及组织样本中小分子代谢物葡萄糖‑6‑磷酸、赤藓糖‑4‑磷酸、黄嘌呤和磷脂酰胆碱PC(33:1)作为联合型代谢标志物在制备用于诊断受试者中的肺癌和肺部良性结节患者的试剂盒中的新应用。本发明还涉及检测受试者中的肺癌和肺部良性结节患者的试剂盒，通过检测来自受试者组织样本中上述联合标志物各自的相对浓度，基于二元逻辑回归方程计算所述联合标志物变量P值，再基于确定的截点值(cutoff)，诊断肺癌和肺部良性结节患者。此外，该联合标志物对早期肺癌和肺部良性结节患者也有较好的诊断能力。所述试剂盒可实现高灵敏、高效检测本发明涉及的几种小分子代谢物，具有检测成本低，重复性好的特点。

技术领域

本发明涉及一种新的组合标志物在制备诊断肺癌和肺癌良性结节的试剂盒中的用途。属于分析化学，生物化学以及临床医学领域。

背景技术

肺癌是全球死亡率最高的恶性肿瘤。早期肺癌症状不明显以及其他肺部良性结节的干扰是肺癌临床诊断的难题。尽管对肺癌的研究一直是肿瘤学和临床医学的研究热点，但是其致病机制尚未明确，它涉及多基因遗传，环境因素以及生活方式的共同作用。目前血清肿瘤标志物、影像学检查是肺癌筛查的主要方法。然而，血清肿瘤标志物癌胚抗原在诊断肺癌过程中存在特异性和灵敏度低的问题。影像学检查包括X线胸部摄片、CT(计算机断层扫描)检查和低剂量胸部CT检查等。其中低剂量胸部CT由于辐射小，检测灵敏度高受到国内外广泛关注和使用，但其缺点是假阳性率高，经常把肺部良性结节误诊为肺癌(文献1：Team，T.N.L.S.T.R.，Reduced Lung-Cancer Mortality with Low-Dose ComputedTomographic Screening.N Engl.J.Med.2011，Vol.365No.5.)，从而引起患者不必要的恐慌，也会导致医生采取不当的治疗方案。因此开发一种新方法用于诊断肺癌和肺部良性结节，尤其是区分早期肺癌和肺部良性结节对指导临床治疗方案以及降低肺癌死亡率具有非常重要的现实意义。

肿瘤被广泛认为是一种代谢性疾病，肿瘤细胞存在着代谢重编程过程。肿瘤细胞中糖代谢、氨基酸代谢、核苷酸代谢、脂质代谢等多种代谢过程发生异常改变以支持肿瘤细胞的大量增殖。近年来代谢组学作为一个新的有利工具广泛应用于肿瘤诊断中。色谱-质谱联用技术是代谢组学研究的主要手段，基于色谱-质谱联用的代谢组学手段发现重要小分子代谢物在癌症诊断中已有许多成功的应用，包括检测苯丙酰色氨酸和甘氨胆酸作为联合标志物应用于肝癌诊断(文献2：Luo，P.；Yin，P.；Hua，R.；Tan，Y.；Li，Z.；Qiu，G.；Yin，Z.；Xie，X.；Wang，X.；Chen，W.；Zhou，L.；Wang，X.；Li，Y.；Chen，H.；Gao，L.；Lu，X.；Wu，T.；Wang，H.；Niu，J.；Xu，G.，A Large-scale，multicenter serum metabolite biomarkeridentification study for the early detection of hepatocellularcarcinoma.Hepatology 2018，67(2)，662-675.)，检测鞘氨醇作为前列腺癌判别标志物(文献3：Shancheng Y.S.，Integration of metabolomics and transcriptomicsreveals major metabolic pathways and potential biomarker involved in prostatecancer.Molecularcellular proteomics 2015.)等。由于单一代谢物受环境影响很大，因此可以在差异代谢物中选用几个小分子代谢物组成“联合型代谢标志物”，并以判别公式计算“判别可能性”P值(Probability)，此方法可以有效改善代谢物对疾病诊断的灵敏度和特异性。值得一提的是，相对于体液而言组织可以更直观的反应疾病引起的原始代谢变化，这在寻找疾病标志物中至关重要(文献4：4.Moreno，P.；Jimenez-Jimenez，C.；Garrido-Rodriguez，M.；Calderon-Santiago，M.；Molina，S.；Lara-Chica，M.；Priego-Capote，F.；Salvatierra，A.；Munoz，E.；Calzado，M.A.，Metabolomic profiling of human lungtumor tissues-nucleotide metabolism as a candidate for therapeuticinterventions and biomarkers.Mol Oncol 2018，12(10)，1778-1796.)。所以基于组织的代谢组学正受到越来越多的关注。