[发明专利]一种肠道益生元黑皮鸡枞菌多糖ORP-1及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种肠道益生元黑皮鸡枞菌多糖ORP‑1及其制备方法和用途，所述肠道益生元为黑皮鸡枞菌多糖ORP‑1，它是以黑皮鸡枞菌多糖为原料，经分步醇沉、DEAE‑52纤维素柱层析及superdex‑75分子筛凝胶柱层析分离纯化获得；该化合物分子量为2.4×10⁴Da，其单糖组成按摩尔比为甘露糖:葡萄糖:半乳糖:岩藻糖＝1.48:1.00:29.65:8.22。在体外模拟口腔、胃及小肠消化过程中，该新型肠道益生元具有抵抗消化的特性，但在人体粪便体外模拟酵解过程中，能被粪便微生物酵解利用，并促进肠道益生菌两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)和嗜酸乳杆菌(Lacrobacillus acidophilus)的增殖。

技术领域

本发明属于益生元食品技术领域，具体涉及一种肠道益生元黑皮鸡枞菌多糖ORP-1及其制备方法和用途。

技术背景

黑皮鸡枞菌，学名卵孢小奥德蘑(Oudemansiella raphanipes)。该菌具有很高的食用和药用价值，也是我国传统的药用真菌之一。因其鲜嫩醇香、肉质细嫩、洁白如玉、口感独特、生熟皆可食、食药两用、营养丰富而备受人们的青睐。与其它真菌多糖相比，目前对黑皮鸡枞菌多糖的研究还较少。大部分的研究集中在黑皮鸡枞菌多糖提取工艺优化和菌丝体液体发酵培养基的优化，黑皮鸡枞菌多糖活性研究鲜有报道。

“益生元”(prebiotics)是指赋予宿主健康益处的宿主微生物选择性利用的基质。目前国际上认可的益生元主要包括低聚果糖(FOS)、低聚异麦芽糖(IMO)、低聚乳果糖(LACT)等。一些藻类、植物等的天然提取物也能作为益生元使用。一般评估益生元功效主要针对三个方面：(1)在上消化道不被消化，对胃部的酸性环境和各类消化酶具有抵抗性，能够在进入大肠前保持完整性；(2)在大肠内能够被某类微生物选择性发酵利用从而改善肠道菌群促进人体健康；(3)促进肠道中一种或几种有益菌生长并增强其活性。

现阶段对于多糖益生效果的研究手段主要有两种：一是动物试验，主要利用小鼠、兔子等哺乳动物来消化多糖，再对特定指标进行检测；二是利用胃肠道模拟器，对消化前后的消化液进行检测，从而判断多糖对肠道菌群的影响。静态模拟消化系统由于无需特殊仪器设备且操作简单，成为当前应用最为广泛的胃肠道体外模拟器。该消化系统包括三个部分，分别为口腔模拟体系、胃部及小肠模拟体系和大肠发酵体系，前两部分根据人体消化道内实际情况通过消化过程温度、消化液组成、消化环境的pH及消化时间对消化生理条件进行模拟，大肠发酵体系为批式发酵，将菌液加入到所需培养基中进行厌氧发酵且过程中不添加营养物质，此方法易建立模型，多用于研究底物消化情况。多糖是一种天然高分子聚合物，大量体外模拟消化实验表明，多糖很难通过胃肠道直接吸收，但可被肠道微生物分解利用产生短链脂肪酸(SCFA)。短链脂肪酸对维持肠黏膜屏障完整性、稳定肠道微环境具有积极意义。研究表明，香菇、平菇、杏鲍菇等食用菌多糖及某些植物多糖具有潜在的益生元活性。

发明内容

本发明旨在提供一种肠道益生元黑皮鸡枞菌多糖ORP-1及其制备方法和用途。本发明ORP-1作为一种新型肠道益生元，其满足益生元的三个特性，具有潜在的益生元活性，在医疗保健等领域具有广阔的应用前景。本发明首次将黑皮鸡枞菌多糖经分离纯化得到的单一组分多糖ORP-1应用于体外模拟消化、酵解实验，使得对黑皮鸡枞菌多糖的益生元活性研究更具有目的性和靶向性。

本发明黑皮鸡枞菌多糖ORP-1，是以黑皮鸡枞菌多糖为原料，分离纯化后获得的单一组分多糖ORP-1，其分子量为2.4×10⁴Da，其单糖组成按摩尔比为甘露糖:葡萄糖:半乳糖:岩藻糖＝1.48:1.00:29.65:8.22。

本发明黑皮鸡枞菌多糖ORP-1的制备方法，包括如下步骤：

步骤1：以600mg纯度不低于85％的黑皮鸡枞菌粗多糖为原料，以40vt％、50-90vt％乙醇进行分步醇沉；