[发明专利]全自动显微图像景深拓展系统及其方法有效
申请号: | 201911059420.6 | 申请日: | 2019-11-01 |
公开(公告)号: | CN110824689B | 公开(公告)日: | 2022-02-18 |
发明(设计)人: | 左超;薛国飞;张岩;陈钱;孙佳嵩;卢林芃;李加基;张佳琳;顾国华 | 申请(专利权)人: | 南京理工大学 |
主分类号: | G02B21/36 | 分类号: | G02B21/36 |
代理公司: | 南京理工大学专利中心 32203 | 代理人: | 唐代盛 |
地址: | 210094 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 全自动 显微 图像 景深 拓展 系统 及其 方法 | ||
1.一种全自动显微图像景深拓展方法,其特征在于步骤如下:
第一步:显微图像的自动聚焦处理,即多次移动步进电机(2),带动物镜(6)移动采集图像,按照这种方式进行遍历,对采集到的图像进行处理,先是对图像进行高斯滤波,再对滤波后的图像求Tenengrad函数值,得到该图像的清晰度聚焦评价函数值,比较每一张图像的聚焦评价函数值,得到一个最大的聚焦评价函数值,回到该聚焦评价函数值对应的位置;
第二步:自动聚焦步骤完成后,按照聚焦到的位置进行景深拓展,对图像融合得到目标图像,通过照明系统(8)、物镜(6)、筒镜(5)组成显微成像系统,显微成像系统成像后,彩色相机(1)采集像面上的图像,步进电机(2)移动,带动物镜(6)在设置的上下范围内采集图像,通过彩色相机(1)采集到这一系列图像后,然后对所有图像中对应像素值进行比较,根据聚焦位置处亮度最小的特征,取每个像素位置处的最小像素值作为最佳像素值,依次遍历所有像素,得到目标图像每个像素的像素值,该目标图像就是景深拓展后的结果;
所述彩色相机(1)固定在筒镜(5)尾端,用于实时采集显微镜的成像,物镜(6)安装在筒镜(5)前端下方位置,筒镜(5)与步进电机(2)通过中间设备固定,通过前后左右移动步进电机(2)改变采集视野,通过上下移动步进电机(2)移动采集显微镜聚焦范围内图像;
其中,两次聚焦实现景深拓展的具体步骤如下:
第一步,假设目标图像总数目用行数row乘以列数col来表示,设置行方向运动步长row_d,列方向运动步长col_d,景深拓展中需要融合的图像数目为N,以及物镜(6)移动步长z_d,其次设置一次聚焦的总位移AF1_dis以及运动步长AF1_d,二次聚焦的总位移AF2_dis以及运动步长AF2_d,并且AF1_d大于AF2_d;
第二步,步进电机(2)按照上一步设置的参数首先移动到拍摄视野的第一行第一列的位置,首先进行第一次聚焦,进行步长AF1_d往下运动通过彩色相机(1)采集图像,并对图像进行自动聚焦处理,直到运动完AF1_dis总位移,会算出最清晰图像的位置,并返回该最清晰图像位置,该过程相当于粗聚焦,然后再往上移动二次聚焦总位移的一半距离AF2_dis/2,往下进行步长AF2_d的运动,进行第二次聚焦,同样运动完AF2_dis位移后会得到一个最清晰图像的位置,返回到第二次得到的最清晰图像的位置,即为该视野位置的聚焦点,第二次聚焦相当于细聚焦;
第三步,根据第二步第一行第一列聚焦到的位置,开始按照融合总张数N与运动步长z_d进行往上运动(N-1)*z_d/2位移,并从该位置开始进行采集图像,然后往下按运动步长z_d由步进电机(2)移动总共(N-1)*z_d位移,每移动一个步长,彩色相机(1)采集一次图像,采集完后返回到上一步的二次聚焦位置;
第四步,将第三步在该视野位置采集到的一系列图像进行图像融合处理,最终得到该视野位置经过景深拓展后的图像,即目标图像;
第五步,在上一步处理完后得到第一张目标图像后,再沿行方向移动一个步长row_d到第一行第二列位置,也就是下一个视野位置,和上一个视野一样先进行二次聚焦,聚焦到聚焦面后进行上下范围内图像采集,采集完图片后进行图像融合,得到第二张目标图像;后面的移动过程和上面一样,每移动一个步长进行一次景深内的图像采集、融合,继续往行方向移动,一直移动到第col列,再以col_d步长移动到第二行第col列,再按行方向移动到第col-1、第col-2列……第2列、第1列,再以col_d步长移动到下一行第1列,再按行方向移动到第2列、第3列……第col-1列、第col列......一直按上述方法切换视野,直到获得row*col张目标图像到达最后视野位置结束整个过程。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于遍历的步骤如下:
步骤一,第一次遍历,步进电机(2)运动,带动物镜(6)一起移动,估计离焦距离使得物镜(6)移动到第一次遍历的起始位置a1,并确定起始搜索域[a1,b1],b1是第一次遍历的结束位置,以大步长遍历整个搜索区域,得到第一次遍历的聚焦位置1,步进电机(2)移动使得物镜(6)移动到第一次遍历的聚焦位置1处;
步骤二,步进电机(2)驱动物镜(6)运动到第一次遍历的聚焦位置1处上一段距离,设置第二次搜索域[a2,b2],a2、b2分别是第二次遍历的起始位置、结束位置,以小步长进行第二次搜索,得到第二次遍历的聚焦位置2;
步骤三,不断减小移动步长,重复步骤二,当步长小于阈值聚焦结束,步进电机(2)控制物镜(6)返回到聚焦位置处。
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