[发明专利]以蓝光激活的blebbistatin类似物杀灭耐药细菌的应用及方法

权利要求书

1.以蓝光激活的blebbistatin类似物在制备杀灭耐药细菌药物的应用，blebbistatin类似物的结构式为：

X₁, X₂, X₃, X₄和X₅中之一可以为H、CN、CF₃、F、Cl、Br、I中的一种；当X₁, X₂, X₃, X₄和X₅中之一为上述基团时，其余的四个基团为H；R₁, R₂, R₃, R₄和R₅中之一可以为H、CN、NH₂、F、Cl、Br、I、烷基、卤代烷基、杂烷基、烯基、炔基、芳基、烷芳基、杂环基、环烷基、环烯基、环炔基、羟基烷基、氨基烷基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、烷芳基氨基、芳氧基、芳基烷氧基、酰氧基、氨基甲酰基、三氟甲基、三氟甲氧基、苯氧基、苄氧基、膦酸、磷酸酯、磺酸、磺酸酯、磺酰胺；当R₁, R₂, R₃, R₄和R₅之一为上述基团时，其余的四个基团均为H。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述耐药细菌包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肠球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌。

3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述蓝光波长为420 nm。

4.一种如权利要求1所述应用中的blebbistatin类似物杀灭耐药细菌的方法，其特征在于，主要包括：采用2倍工作密度的对数期耐药细菌菌液与2倍工作浓度的blebbistatin类似物1:1混匀后进行波长为420 nm的蓝光光照30-60 min。

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，蓝光光源置于对数期耐药细菌菌液上方的7.2 cm处。

6.根据权利要求4所述方法，其特征在于，所述对数期耐药细菌菌液的工作密度为10⁸cfu/mL或以下；所述blebbistatin类似物工作浓度为2 μM-10 μM。

7.根据权利要求4所述方法，其特征在于，所述对数期耐药细菌菌液的培养方法主要包括：

（1）储存于-80℃的耐药细菌于琼脂平板上划线多次，倒扣平板培养12 h后获得单克隆菌；

（2）将单克隆菌挑取于LB培养基和/或MH培养基中，摇床中培养1.5 h获得对数期的耐药细菌菌液。

8.根据权利要求4所述方法，其特征在于，所述2倍工作浓度的blebbistatin类似物的配制方法为：将blebbistatin类似物提前配制于DMF溶液中配制成母液，再于磷酸盐缓冲液PBS中稀释成2倍工作浓度。