[发明专利]一种增加毛囊单位中毛发数量的组合物及其制备方法

权利要求书

1.一种增加毛囊单位中毛发数量的组合物，其特征在于该组合物包括A液、B液和C液；A液、B液和C液的体积比为(1-2):(0.5-1):(7-8.5)；

其中A液包括乳酸0.1-10.0mg/ml、枸橼酸0.1-1.5mg/ml、葡萄糖酸1.0-4.4mg/ml、色氨酸3-30μg/ml和去离子水；

B液包括白介素-1受体拮抗剂3.0-14.0ng/ml、可溶性肿瘤坏死因子受体-1 10.0-30.0ng/ml和去离子水；

C液为血小板裂解液；

所述C液的制备方法为：

A、采集自体血液，加入抗凝剂，得到抗凝血，于20℃、200g-250g条件下离心10-15min，去除下层红细胞；然后将离心管内剩余血液混合均匀，再在22℃、3000g条件下离心15-20min，然后去掉上层4/5的血浆，将底层剩余的1/5血浆颠倒混匀，为浓缩的血小板血浆；

B、将步骤A获得的浓缩血小板血浆冰浴超声10-15min，之后液氮浴1-2小时，获得血小板血浆裂解液；

C、将步骤B获得的血小板裂解液从液氮取出复苏后，置于18-25℃静置4-6小时，

D、然后加入硫酸乙酰肝素，4℃下混合均匀，使得硫酸乙酰肝素终浓度为1-3U/ml，然后在37℃水浴静置1小时，再在4℃水浴静置16-24小时，最后37℃水浴静置0.5-2小时；

E、然后在4℃下以200次/min进行往复式剧烈摇动，最后于4℃下1000-1500g离心10-15min，取上清用0.22μm滤器过滤，即得到C液。

2.根据权利要求1所述的一种增加毛囊单位中毛发数量的组合物，其特征在于步骤B中超声频率为20-40KHz，功率为50-90W。

3.根据权利要求1或2所述的一种增加毛囊单位中毛发数量的组合物，其特征在于步骤D中硫酸乙酰肝素的分子量为15000。

4.根据权利要求1所述的一种增加毛囊单位中毛发数量的组合物，其特征在于步骤D中在37℃水浴静置1小时，再在4℃水浴静置22小时，最后37℃水浴静置1-1.5小时。

5.权利要求1所述增加毛囊单位中毛发数量的组合物的制备方法，包括以下步骤：

一、将乳酸、枸橼酸、葡萄糖酸、色氨酸和去离子水混合，配制成A液，其中A液中乳酸浓度为0.1-10.0mg/ml，枸橼酸浓度为0.1-1.5mg/ml，葡萄糖酸浓度为1.0-4.4mg/ml，色氨酸浓度为3-30μg/ml；

二、将白介素-1受体拮抗剂、可溶性肿瘤坏死因子受体-1和去离子水混合，配制成B液，其中B液中白介素-1受体拮抗剂浓度为3.0-14.0ng/ml，可溶性肿瘤坏死因子受体-1浓度为10.0-30.0ng/ml；

三、C液的制备：

A、采集自体血液，加入抗凝剂，得到抗凝血，于20℃、200g-250g条件下离心10min，去除下层红细胞；然后将离心管内剩余血液混合均匀，再在22℃、3000g条件下离心15min，然后去掉上层4/5的血浆，将底层剩余的1/5血浆颠倒混匀，为浓缩的血小板血浆；

B、将步骤A获得的浓缩血小板血浆冰浴超声10-15min，之后液氮浴1-2小时，获得血小板血浆裂解液；

C、将步骤B获得的血小板裂解液从液氮取出复苏后，置于18-25℃静置4-6小时，

D、然后加入硫酸乙酰肝素，4℃下混合均匀，使得硫酸乙酰肝素终浓度为1-3U/ml，然后在37℃水浴静置1小时，再在4℃水浴静置16-24小时，最后37℃水浴静置0.5-2小时；

E、然后在4℃下以200次/min进行往复式剧烈摇动，最后于4℃下1000-1500g离心10-15min，取上清用0.22μm滤器过滤，即得到C液；

四、将A液、B液和C液按体积比为(1-2):(0.5-1):(7-8.5)混合均匀，即得到增加毛囊单位中毛发数量的组合物。

6.根据权利要求5所述的增加毛囊单位中毛发数量的组合物的制备方法，其特征在于步骤B中超声频率为20-40KHz，功率为50-90W。