[发明专利]一种抗氧化地菍提取物的制备方法

说明书

本发明属于天然药物领域，具体涉及一种抗氧化地菍提取物的制备方法。本发明针对地菍抗氧化的物质基础研究不充分等问题，以清除DPPH自由基为抗氧化活性评价依据，对提取溶剂、提取温度、提取时间和液料比等因素进行考察，并在单因素实验基础上，利用响应面法对实验因素进一步优化，明确地菍抗氧化成分的提取工艺；同时采用大孔吸附树脂法对地菍抗氧化活性成分进行纯化研究，通过对上样量、上样浓度、上样速度、洗脱溶剂和体积等因素的考察，最终建立了地菍抗氧化提取物的制备工艺。依据本发明制备的地菍抗氧化提取物，是没食子酸和鞣花酸为母核的混合物，其抗氧化活性显著提高，有利于地菍相关产品的开发和综合利用。

技术领域

本发明属于天然药物领域，具体涉及一种抗氧化地菍提取物的制备方法。

背景技术

地菍为野牡丹科野牡丹属植物地菍Melastoma dodecandrum Lour.的干燥全草，具有清热化湿、祛瘀止痛、收敛止血之功效；临床主要用于高热、咽喉肿痛、牙痛、黄疸、水肿痛经、产后腹痛、崩漏带下、痢疾便血、痈肿疔疮、毒蛇咬伤等病症；民间还用于治疗流行性脑脊髓膜炎、肾炎、肾盂炎、肠炎、盆腔炎、急性扁桃体炎、外伤出血、腰腿痛和风湿骨痛等。现代药理学研究还显示，地菍具有降血糖、镇痛抗炎、调血脂、抗氧化、保肝作用等(王金凤,张评浒,王雨彤,王玲华,李强,李谦,张建军.民族药地菍研究进展[J].中草药,2018,49(05):1211-1219.)。

目前，有研究表明地菍的乙酸乙酯部位的总黄酮和总多糖具有一定抗氧化活性(李丽,罗泽萍,周焕第,等.地菍乙酸乙酯提取部位对糖尿病小鼠血糖、血脂及抗氧化作用的影响[J].中国老年学杂志,2015,35(12):3250-3252；张超,张婷,姚慧珍.地菍总黄酮体外抗小鼠肝线粒体脂质过氧化作用的研究[J].中医药学刊,2005,23(9):1680-1682；张超,姚惠珍,徐兰琴,等.地菍多糖MD1清除活性氧自由基及对人红细胞膜脂质过氧化作用影响的研究[J].广州医学院学报,2002,30(4):18-21.)，但是，目前对地菍抗氧化的物质基础研究并不充分。本发明的发明人在研究中发现，地菍中的总黄酮、总多糖提取并非是地菍抗氧化作用的关键有效组分。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术问题的不足，提供一种抗氧化作用显著性高于地菍乙酸乙酯部位、总黄酮和总多糖的地菍提取物的制备方法。本发明以清除DPPH自由基为抗氧化活性评价依据，通过对提取工艺、纯化工艺的优化，建立了抗氧化地菍提取物的制备工艺；并且通过谱效关系分析，建立了地菍提取物的检测方法。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

一种抗氧化地菍提取物的制备方法，所述抗氧化地菍提取物为以没食子酸和鞣花酸为母核的混合物，具有抗氧化活性，所述抗氧化地菍提取物的制备方法，包括如下步骤：

(1)将地菍的根、茎、叶、果实或上述任意多种植物部位的组合，置25-55℃的烘箱内烘干，取出，粉碎，过10-100目筛，得到地菍粉末A。

(2)取步骤(1)所得的粉末A，使液料比为0.01-5mL/mg，提取溶剂为0-100％甲醇水溶液；上述混合物在0-100℃的水浴超声提取15-75min，取出，冷却至室温，以3500rpm离心15min，得上清液B。

(3)取步骤(2)所得的上清液B，采用旋转蒸发仪，在25-55℃水浴浓缩至干，然后加入水溶解，使水溶液的抗氧化活性当量为5-40umol/mL，即得地菍提取物的水溶液C。