[发明专利]一种金色裂叶桦的创制方法

说明书

本发明公开了一种金色裂叶桦的BpGLK基因，所述BpGLK基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；该基因表达的蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。还公开了一种金色裂叶桦pGLKRNAi干扰表达载体，包含所述的BpGLK基因。还公开了一种金色裂叶桦的创制方法，包括以下步骤：根据所述的BpGLK基因的保守序列，构建pGLKRNAi干扰表达载体，采用农杆菌介导法导入裂叶桦，使得转基因裂叶桦中的BpGLK基因低量表达，叶片呈现黄色。该创制方法通过基因工程育种手段干扰BpGLK基因的表达，进而降低BpGLK在转基因裂叶桦中的表达水平，获取黄色叶片的裂叶桦，是创制裂叶桦新品种的有效方法。

技术领域

本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种金色裂叶桦的创制方法。

背景技术

裂叶桦(Betula pendula'Dplecprlicp')又称裂叶垂枝桦，是来自欧洲白桦中的一个品种，它除了树干洁白、叶片绿色，枝条下垂外，其最明显的是叶片呈现多裂状，似茶条槭(Acer ginnala Maxim.)，观赏价值很高。

随着社会的进步、经济的发展，人们对彩色树种的重视程度也在逐年上升，传统的广谱性的单一绿色已远远不能满足人们在绿化工程中的需求，在进行园林植物配置时，向更丰富的彩叶植物品种转变已经成为发展的总趋势。其中黄叶观赏植物是彩叶植物中的重要组成部分，黄色叶片是自然界中最醒目、明度最高的色彩，其应用前景广阔。金叶裂叶桦的创制方法，在园林植物配置中，可以丰富构图、调整色彩、形成绚丽的图案和不同的季相结果。在目前城市绿化中成为新宠，发展前景广阔。

鉴于构建彩色植物的需求，而现有技术中目前又尚无利用基因工程创制彩色裂叶桦的相关报道，因此，本发明提出了一种金叶裂叶桦的创制方法，为其他桦树新品种创制提供参考。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种金色裂叶桦的BpGLK基因，该基因调控叶片颜色。

本发明还有一个目的是提供一种由金色裂叶桦的BpGLK基因编码的蛋白质。

本发明还有一个目的是提供一种金色裂叶桦pGLKRNAi干扰表达载体，其携带BpGLK基因201bp保守序列，转入裂叶桦中，并使BpGLK基因低量表达，叶片呈现黄色。

本发明还有一个目的是提供一种金色裂叶桦的创制方法，通过构建pGLKRNAi干扰表达载体，采用农杆菌介导法将该载体导入裂叶桦，使得转基因裂叶桦中的BpGLK基因低量表达，叶片呈现黄色，创制裂叶桦新品种。

本发明还有一个目的是提供一种所述的金色裂叶桦的BpGLK基因的应用，创制具有黄色叶片的裂叶桦。

为了实现本发明的这些目的和其它优点，提供了一种金色裂叶桦的BpGLK基因，所述BpGLK基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

本发明还提供一种由所述的金色裂叶桦的BpGLK基因编码的蛋白质，所述蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

本发明还提供一种金色裂叶桦pGLKRNAi干扰表达载体，包含所述的BpGLK基因201bp保守序列。

本发明还提供一种金色裂叶桦的创制方法，包括以下步骤：根据所述的BpGLK基因201bp的保守序列，构建pGLKRNAi干扰表达载体，采用农杆菌介导法导入裂叶桦，使得转基因裂叶桦中的BpGLK基因低量表达，叶片呈现黄色。

优选的是，pGLKRNAi干扰表达载体具体构建方法，包括以下步骤：

步骤1：以野生型白桦的叶片cDNA为模板，BpGLK_F_BamHI和BpGLK_R_XbaI为引物，获得BpGLK目的片段；