[发明专利]一种含人参皂苷的湖羊胚胎体外培养液

说明书

本发明公开了一种湖羊胚胎体外培养液，包含常规胚胎培养液和以下组分：牛血清白蛋白、人参皂苷、赖氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、维生素C、青霉素、链霉素。本发明还公开了所述湖羊胚胎体外培养液在湖羊体外胚胎培养中的用途。本发明在常规胚胎培养液中加入人参皂苷和三种必需氨基酸，可以有效促进湖羊胚胎体外发育，提高体外培养胚胎的分裂率和囊胚率，在湖羊胚胎体外培养中具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于胚胎体外培养技术领域，具体涉及一种含人参皂苷的湖羊体外培养液。

背景技术

湖羊是太湖平原重要的家畜之一，是我国一级保护地方畜禽品种。湖羊体格中等，公、母均无角，头狭长，鼻梁隆起，多数耳大下垂，颈细长，体躯狭长，背腰平直，腹微下垂，尾扁圆，尾尖上翘，四肢偏细而高。被毛全白，腹毛粗、稀而短，体质结实。湖羊为稀有白色羔皮羊品种，具有早熟、四季发情、一年二胎、每胎多羔、泌乳性能好、生长发育快、改良后有理想产肉性能、耐高温高湿等优良性状，分布于我国太湖地区，终年舍饲中国羔皮用绵羊品种，产后1～2日宰剥的小湖羊皮花纹美观，著称于世。

胚胎体外生产技术已成为加快品种选育和优良种群扩繁速度的重要途径。虽然通过胚胎体外生产技术已经获得了活的后代，但体外受精或克隆获得的体外胚胎在培养过程中普遍存在发育阻断现象，即胚胎发育到一定阶段后停止发育并发生退化，导致体外胚胎的囊胚发育率远低于体内胚胎。而胚胎的体外培养通常是成功进行胚胎移植的前序程序，通过对胚胎的体外培养可以促进胚胎的发育。因此完善胚胎的早期培养体系、建立能提高囊胚发育率的体外培养液对胚胎体外生产技术推广应用具有重要的意义。

发明内容

基于此，本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种湖羊胚胎体外培养液，其含有人参皂苷和三种必需氨基酸，可以有效促进湖羊胚胎体外发育，提高体外培养胚胎的存活率和囊胚率。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：一种湖羊胚胎体外培养液，包含常规胚胎培养液和以下组分：牛血清白蛋白、人参皂苷、赖氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、维生素C、青霉素、链霉素。

优选地，所述的湖羊胚胎体外培养液包含常规胚胎培养液和以下浓度的组分：牛血清白蛋白6～8.5g/L、人参皂苷5～20mM、赖氨酸0.2～0.5g/L、异亮氨酸 0.1～0.5g/L、缬氨酸0.1～0.5g/L、维生素C 100～150mg/L、青霉素10万IU/L、链霉素100μg/L。

更优选地，所述的湖羊胚胎体外培养液中人参皂苷的浓度为15mM。

更优选地，所述的湖羊胚胎体外培养液中赖氨酸、异亮氨酸和缬氨酸质量比为2：1：1。

优选地，所述常规胚胎培养液为人工合成输卵管液。

本发明还提供了所述的湖羊胚胎体外培养液在湖羊胚胎体外培养中的用途。

本发明还提供了一种湖羊胚胎体外培养方法，包括如下步骤：将受精后的湖羊胚胎用常规胚胎培养液冲洗，然后再用所述的湖羊胚胎体外培养液于 38～39℃、5％CO₂环境内进行培养。

优选地，所述常规胚胎培养液为人工合成输卵管液。

牛血清白蛋白(BSA)，是牛血清中的一种球蛋白，包含607个氨基酸残基，分子量为66.446KDa，成分主要包括蛋白质、多肽、激素、氨基酸、葡萄糖、酮酸等。其中，蛋白质是牛血清中主要成份，除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外主要还有白蛋白，球蛋白。纤维粘连素细胞促进细胞附着；α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用；胎牛血清中含胎球蛋白促细胞附着；转铁蛋白能结合铁离子，减少其毒性和被细胞利用。血小板促生长因子能促细胞分裂，是多肽家庭的主要成员之一，是主要的促细胞增殖因子；成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等对细胞生长也有一定作用。其含有的促生长激素具有促细胞增殖效应。