[发明专利]一种高准确度的高密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒

说明书

本发明适用于高密度脂蛋白胆固醇检测技术领域，提供了一种高准确度的高密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，包括包括第一试剂和第二试剂；第一试剂包括缓冲液I、凝集剂、显色剂、第一防腐剂、表面活性剂I、表面活性剂II、保护剂和酶I；第二试剂包括缓冲液、助色剂、第二防腐剂、保护剂、表面活性剂II和酶II；酶I包括胆固醇氧化酶和过氧化物酶，其中胆固醇氧化酶来源于假单胞菌属；酶II为胆固醇酯酶，来源于裂殖菌或假单胞菌属；第一试剂中，表面活性剂I和表面活性剂II的浓度比为：1:3～4。借此，本发明能够提高HDL‑C检测的准确度，解决现有技术中HDL‑C检测试剂检测准确度低的问题，为相关疾病的诊断及预防提供了可靠依据。

技术领域

本发明涉及高密度脂蛋白胆固醇检测技术领域，尤其涉及一种高准确度的高密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒。

背景技术

胆固醇在血液中存在于脂蛋白中，其存在形式包括高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇、极低密度脂蛋白胆固醇几种。在血液中存在的胆固醇绝大多数都是和脂肪酸结合的胆固醇酯，仅有10％不到的胆固醇是以游离态存在的。胆固醇在体内有着广泛的生理作用，但当其过量时便会导致高胆固醇血症，对机体产生不利的影响。现代研究已发现，动脉粥样硬化、静脉血栓形成与胆石症与高胆固醇血症有密切的相关性。高密度脂蛋白有助于清除细胞中的胆固醇。因此，测定HDL-C在临床上有重要意义。

目前HDL-C含量测定在临床实验中已经常规化。美国胆固醇教育计划对HDL-C测定的建议中指出：HDL-C在一个很窄的浓度范围内与冠心病呈负相关，冠心病危险增高的界限是在HDL-C浓度范围的低端，测定的细小误差会产生相对大的影响，因此，HDL-C测定的准确性非常重要。

现有的测定方法中，包括第一代直接测定法、第二代磁性硫酸葡聚糖法和第三代匀相测定法；现有技术中经常使用的方法是匀相测定法，包括PEG修饰酶法、选择性抑制法、抗体法和过氧化氢酶法。PEG修饰法需要对酶进行修饰，很大程度上降低了酶的活性，造成成本增加；抗体法中特异性抗体价格昂贵且反应步骤多，实用性差；选择抑制法的关键是表面活性剂的选择，但表面活性剂的使用比较困难，对非高密度脂蛋白的掩蔽抑制不完全，同时对高密度脂蛋白的释放不彻底。上述几种方法对HDL-C检测的准确度都有保留。

综上可知，现有技术在实际使用上显然存在不便与缺陷，所以有必要加以改进。

发明内容

针对上述的缺陷，本发明的目的在于提供一种高准确度的高密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，其能够提高HDL-C检测的准确度，解决现有技术中HDL-C检测试剂检测准确度低的问题，为相关疾病的诊断及预防提供了可靠依据。

为了实现上述目的，本发明提供一种高准确度的高密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，包括第一试剂和第二试剂。

所述第一试剂包括如下组分：缓冲液I 0.02-0.8mol/L、凝集剂2～18g/L、显色剂0.5-5.0mmol/L、第一防腐剂0.5-2.0g/L、表面活性剂I1.0-12.0ml/L、表面活性剂II 8.0-25.0ml/L、保护剂22～160g/L和酶I 2～100Ku/L。

所述第二试剂包括如下组分：缓冲液II0.02-0.8mol/L、助色剂1.0-10.0mmol/L、第二防腐剂0.5-2.0g/L、保护剂22～160g/L、表面活性剂II8.0-25.0ml/L和酶II 1.0-50.0Ku/L。

所述酶I包括胆固醇氧化酶和过氧化物酶，其中胆固醇氧化酶来源于假单胞菌属；所述酶II为胆固醇酯酶，来源于裂殖菌或假单胞菌属。

所述第一试剂中，表面活性剂I和表面活性剂II的浓度比为：1:3～4。

根据本发明的高准确度的高密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒，所述缓冲液I和所述缓冲液II均为3-吗啉丙磺酸、1,4-哌嗪二乙磺酸、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、一水吗啉乙磺酸中的任意一种或几种。