[发明专利]一种淋巴细胞分离液的生产方法及配方

说明书

本发明属于淋巴细胞分离技术领域，具体涉及一种淋巴细胞分离液的生产方法及配方。该淋巴细胞分离液的配方，一种淋巴细胞分离液的配方，具体包括以下组成物质：蔗糖、葡甲胺、泛影酸和氯丙胺，各组成物质的质量为：蔗糖8‑12kg、葡甲胺3‑3.5kg、泛影酸3‑6kg和氯丙胺8‑10kg。其有益效果是：制作方法简单，提取出细胞比常规方法多出1倍，生产升本低，效果好，处于行业领先地位。

技术领域

本发明属于淋巴细胞分离技术领域，具体涉及一种淋巴细胞分离液的生产方法及配方。

背景技术

纯淋巴细胞群的采集是利用单核细胞在37℃和Ca2+存在时，能主动粘附在玻璃、塑料、尼龙毛、棉花纤维或葡聚糖凝胶的特性，从单个核细胞悬液中除去单核细胞，从而获得纯淋巴细胞群。主要的方法有：①粘附贴壁法;②吸附柱过滤法;③磁铁吸引法，而国内的淋巴细胞分离液已有二十多年的历史，其分离原理是：利用各类细胞本身的密度区别，在具有一定密度的分离液中经过离心，使各类细胞分离开来。但由于葡聚糖是由葡萄糖经过菌种发酵而得，因此其内毒素水平较高，会影响淋巴细胞的表面蛋白活性，且分离液中含不通透的离子diatrizoate(泛影葡胺)，会影响离子通透膜的Gibbs-Donnan平衡(吉布斯—道南膜平衡)。所以，传统的淋巴细胞分离液对细胞有毒性，分得细胞状态不好，影响细胞活性，不利于所提取细胞的后续培养及临床治疗的应用。

发明内容

本发明为了弥补现有技术的缺陷，提供了一种淋巴细胞分离液的生产方法及配方。

本发明是通过如下技术方案实现的：

一种淋巴细胞分离液的配方，具体包括以下组成物质：蔗糖、葡甲胺、泛影酸和氯丙胺，各组成物质的质量为：蔗糖8-12kg、葡甲胺3-3.5kg、泛影酸3-6kg和氯丙胺8-10kg。

进一步，所述各组成物质的质量为：蔗糖8kg、葡甲胺3kg、泛影酸3kg和氯丙胺8kg。

进一步，所述各组成物质的质量为：蔗糖10kg、葡甲胺3.2kg、泛影酸5kg和氯丙胺9kg。

进一步，所述各组成物质的质量为：蔗糖12kg、葡甲胺3.5kg、泛影酸6kg和氯丙胺10kg。

一种淋巴细胞分离液的生产方法，包括以下步骤：

1).将蔗糖与泛影酸合成聚蔗糖；

2).将葡甲胺与氯丙胺配制成溶液；

3).将步骤1与步骤2的PH值控制在6.5-7.5之间；

4).将步骤2配制的溶液采用透析纸包扎，并放入纯净水缸中培养一周，一周后取出检测不能含有氯离子。

5).将步骤4中培养的溶液进行真空浓缩，其中浓稀配制成密度为1.077-1.078制备溶液，从而生产淋巴细胞液。

本发明的有益效果是：制作方法简单，提取出细胞比常规方法多出1倍，生产升本低，效果好，处于行业领先地位。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明一种淋巴细胞分离液的生产方法及配方进行进一步说明。

实施例1：

本实施例的一种淋巴细胞分离液的配方，具体包括以下组成物质：蔗糖、葡甲胺、泛影酸和氯丙胺，各组成物质的质量为：蔗糖8kg、葡甲胺3kg、泛影酸3kg和氯丙胺8kg。

一种淋巴细胞分离液的生产方法，包括以下步骤：

1).将蔗糖与泛影酸合成聚蔗糖；

2).将葡甲胺与氯丙胺配制成溶液；

3).将步骤1与步骤2的PH值控制在6.5；