[发明专利]一种灯盏花药材的质量控制方法

说明书

本发明涉及中药材质量控制技术领域，特别涉及一种灯盏花药材的质量控制方法。该方法包括：将灯盏花药材供试品溶液和对照品溶液分别采用高效液相色谱法进行检测，高效液相色谱法的条件为：C18色谱柱，以磷酸水溶液‑乙腈为流动相进行梯度洗脱，根据获得的供试品溶液色谱图，用中位数法生成灯盏花药材的对照指纹图谱，计算各共有峰的相似度。本发明检测灯盏花药材指纹图谱以及同时测定绿原酸、灯盏花乙素、3,5‑二咖啡酰奎宁酸、4,5‑二咖啡酰奎宁酸4个指标成分的含量。该质量控制方法具有设备要求低、操作简便、分离度高、稳定性和重现性好，既可用作灯盏花药材指纹图谱的检测方法，又可用于同时测定药材中灯盏花乙素等四个成分的含量检测。

技术领域

本发明涉及中药材质量控制技术领域，特别涉及一种灯盏花药材的质量控制方法。

背景技术

灯盏花又名灯盏细辛，为菊科植物短葶飞蓬[Erigeron breviscapus(Vant.)Hand-Mazz.]的干燥全草，其味辛、微苦，性温；归心、肝经，具有活血通络止痛，祛风散寒的功效。灯盏花含有黄酮类、咖啡酰类、香豆素类、木脂素类、萜类等多类化学成分，其中黄酮类和咖啡酰类是灯盏花的特征成分。

目前，《中国药典》2015版灯盏花药材质量标准中，尚未规定指纹图谱检测方法，所用流动相为甲醇-0.1％磷酸溶液(40:60)恒梯度，该方法分离效果不理想，无法有效分离灯盏花药材中各个成分，且只对灯盏花乙素(又称野黄芩苷)单一成分的含量进行测定，不利于药材质量全面控制。

申请号为201811608899.X的专利公开了一种灯盏花药材质量检测方法：供试品前处理采用乙醇对灯盏花药材进行提取，以乙腈：四氢呋喃：0.1-0.2％磷酸＝7:14:79为流动相，恒梯度洗脱，该方法分离效果不佳，仅可用于测定灯盏花乙素单一成分的含量，无法用于灯盏花药材指纹图谱检查，亦无法同时测定绿原酸、灯盏花乙素、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸4个指标成分的含量。

申请号为200910102818.3的专利公开了采用超高压液相色谱(UPLC-PDA)发同时测定灯盏花药材中飞蓬苷、绿原酸、灯盏花苷、野黄芩苷、3,4,-O-二咖啡酰基奎宁酸，3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸、灯盏花甲素、4，5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量。该方法具有检测快速、准确等特点，但是存在设备和色谱柱技术要求高，普通高压液相色谱仪和普通分析性色谱柱无法满足检测条件等不足，在方法可及性和普及型方面受到局限。

通过文献检索，有报道采用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以0.1％甲酸溶液(A)-乙腈(B)-四氢呋喃(C)为流动相，梯度洗脱(0～10min，10％～12％B，1％C；10～15min，12～20％B，1％～1.5％C；15～27min，20％B，1.5％～2.0％C；27～37min，20％～22％B，2.0％C；37～50min，22％～58％B，2.0％～0％C；50～60min，58％～78％B，0％C)，进样量10μl，柱温30℃，流速0.8mL/min，检测波长330nm。以上述色谱条件对灯盏花药材中的绿原酸、咖啡酸、洋蓟素、灯盏花乙素、异绿原酸B、灯盏花甲素、异绿原酸A、异绿原酸C八种成分进行含量测定，从色谱图中可以看出该方法有以下不足：1.基线不平稳，这会导致在计算八种成分含量时计算不准确，无法得出真实值；2.分离效果不佳，最明显的是灯盏花乙素与之后的峰的分离度较小；3.流动相配制颇为复杂。

谢兴亮等人以KromasilC18(4.6mm×250mm，5μm)色谱柱为固定相，甲醇(A)－乙腈(B)－0.1％三氟乙酸(C)为流动相，梯度洗脱(0～30min，11％～13％A，11％～15％B；30～40min，0％A，11％B；40～50min，0％A，20％B；50～65min，20％～65％B，0％～10％C)，流速为1mL·min－1，柱温为35℃，检测波长335nm建立灯盏花药材的指纹图谱。从色谱图可知，该方法可使灯盏花乙素得到很好的分离，但是未能使灯盏花药材中其他成分达到基线分离，仅可用于灯盏花乙素的含量测定，不具有通用性。