[发明专利]一种日本红枫变异品种橙之梦微扦插技术方法

权利要求书

1.一种日本红枫变异品种橙之梦微扦插技术方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1：外植体取材和消毒处理：

S11：选取无病虫害、生长旺盛的橙之梦优良单株于3月份开始恢复生长时，将其放到温室内养护，每隔一周叶面喷洒一次0.3%-0.5%的多菌灵溶液，直至4月份左右，待新芽抽出后，剪取其中半木质化的嫩茎作为外植体材料，将叶片沿叶柄基部切去，嫩茎切成小段（每段有一个休眠腋芽），用清水反复冲洗3-4次，最后无菌水冲洗干净，备用；

S12：将以上处理过备用的小段在超净工作台中先用70%-75%的酒精溶液消毒30-45s，倒掉酒精后，再用0.1%的升汞溶液消毒5-10min，倒掉消毒液，最后用无菌水反复冲洗4-5次，无菌水冲洗和消毒处理的过程中，需不间断地摇动，以保证无菌水和消毒液能够完全与外植体接触，提高消毒效率；

S2：启动培养（初代培养）

S21：在超净工作台中，用无菌刀片先把消毒处理过的小段最下端切口褐化的部分切去，迅速将腋芽茎段的芽向上接种到启动培养基上；

S3：增殖培养（诱导侧芽萌发伸长）

S31：启动培养约20d以后，休眠的腋芽萌发，抽出新的枝条，将新萌发的幼嫩枝条沿腋芽基部切下，接种到增殖培养基上；

S4：过渡培养

S41：增殖培养约45-60d以后，侧芽大量萌发、伸长，将伸长的侧芽枝条切下，接种到过渡培养基上；

S5：微扦插

S51：过渡培养15-20d以后，将瓶苗移到扦插温室的苗床上自然光环境下缓苗7d左右,缓苗第3d开始，慢慢打开培养瓶的瓶盖，7d后，将未生根的小苗从培养瓶中取出，轻轻切除基部愈伤块，然后马上速蘸生根剂（500ppmNAA+1000ppmIAA的混合液）5s，轻轻插入生根基质中（珍珠岩：泥炭=1:1，v/v，移栽前1周左右，用0.8%高锰酸钾溶液消毒处理），然后用0.3%多菌灵溶液对移栽的小苗和基质表面进行均匀喷施，以基质完全浸湿为宜，然后用塑料薄膜做成封闭的小拱棚，进行保温保湿40d（温度35-40℃，相对湿度80%）左右，过程中要适时关注拱棚内温度和湿度，并观察小苗的生长状态，根据其状态调整温度和湿度，待小苗长出须状根并恢复健壮生长后，将小拱棚的两端打开，缓慢放风，约1周后，将小拱棚完全打开，使其在自然条件下生长。

2.根据权利要求1所述的一种日本红枫变异品种橙之梦微扦插技术方法，其特征在于：所述S1中冲洗完成的嫩茎需用0.3%的新洁尔灭消毒液消毒0.5-1小时。

3.根据权利要求1所述的一种日本红枫变异品种橙之梦微扦插技术方法，其特征在于：所述S21中启动培养基的培养条件为：温度25±2℃，光照时间为12h/d，光照强度为2000-2500Lx，湿度为60%-65%。

4.根据权利要求1所述的一种日本红枫变异品种橙之梦微扦插技术方法，其特征在于：所述S21中启动培养基为：wpm+0.15-0.2mg/L激动素（KT）+0.01-0.05 mg/L萘乙酸(NAA) +3%蔗糖+0.6%琼脂，pH为5.8-6.0。

5.根据权利要求1所述的一种日本红枫变异品种橙之梦微扦插技术方法，其特征在于：所述S31中增殖培养基的培养条件为：温度25±2℃，光照时间为12h/d，光照强度为2000-2500Lx，湿度为60%-65%。

6.根据权利要求1所述的一种日本红枫变异品种橙之梦微扦插技术方法，其特征在于：所述S31中增殖培养基为：wpm+0.45-0.5mg/L激动素（KT）+0.05-0.1mg/L萘乙酸(NAA) +3%蔗糖+0.6%琼脂，pH为5.8-6.0。

7.根据权利要求1所述的一种日本红枫变异品种橙之梦微扦插技术方法，其特征在于：所述S41中过渡培养基的培养条件为：温度25±2℃，光照时间为12h/d，光照强度为2500-3000Lx，湿度为60%-65%，过渡培养基为：wpm+3%蔗糖+0.6%琼脂，pH为5.8-6.0。