[发明专利]一种驴的精液稀释液及其制备方法

说明书

本发明公开了一种驴用精液稀释液及其制备方法，包括葡萄糖、乳糖、棉籽糖、五水柠檬酸钠、柠檬酸钾、HEPES、EDTA、卵黄、青链霉素、无菌蒸馏水、脱脂驴奶，还添加了BSA和A溶液，所述A溶液由牛磺酸、L‑赖氨酸盐酸盐、肌醇、维生素B6、维生素B12、柠檬酸、柠檬酸钠、柠檬黄、纯净水组成。所述驴精液稀释液给驴精子提供了最优良的生存环境，保护了驴精子细胞膜的完整性，给精子充分的养分，在保持较高精子活力的前提下，能够抑制精子的代谢，延长精子寿命，便于精子的保存和运输。

发明领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种驴的精液稀释液及其制备方法。

背景技术

我国驴数量大、品种多，可耕地和乘骑，由于社会的发展，驴的役用功能逐渐退出历史舞台。驴肉的蛋白质含量比猪牛肉都高，是典型的高蛋白低脂肪食物，驴皮更是珍贵的食材和药材。但是驴的繁殖力比其他家畜低，导致全国驴的数量急剧下降，许多品种都处于保种状态。近几年驴的选育工作也相对滞后，驴品种质量严重退化。因此必须要充分认识驴种质资源保护的重要性、必要性和紧迫性。

目前良种驴如乌头驴利用率低，优良的种公驴数量少，饲养成本高，自然繁殖率低是制约驴产业发展的重要瓶颈。近年来由于人们对身体保健以及阿胶类保健产品的重视，使得驴产业技术包括人工授精技术研究增多。驴人工授精技术的研究可以极大的提高优良种公驴的繁殖力，对驴产业的发展可产生极大的促进作用。

目前驴人工授精的精液主要有鲜精、保鲜精和冻精。无论哪种形式的精液都需要精液稀释液。目前人工受精采用的精液稀释液主要有脱脂牛奶、INRA96改进版、自配版和发明版，但精液保存时间较短、精子存活率较低、精子活力低，导致初配成功率低。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种驴的精液稀释液及其制备方法，解决了驴精液保存时间较短、驴精子存活率较低、驴精子活力低，导致驴初配成功率低的问题。

一种驴的精液稀释液，包括葡萄糖25g、乳糖1.5g、棉籽糖1.5g、五水柠檬酸钠0.3g、柠檬酸钾0.41g、HEPES 4.76g、EDTA 0.4g、卵黄20mL、青链霉素10000U、无菌蒸馏水470mL、脱脂驴奶500mL、BSA2.5g、A溶液10mL。

所述A溶液由牛磺酸2g、L-赖氨酸盐酸盐2g、肌醇2g、维生素B6 0.31g、维生素B120.23g、柠檬酸0.3g、柠檬酸钠0.2g、柠檬黄0.1、纯净水10mL组成。

所述葡萄糖、乳糖、棉籽糖主要为精子提供直接能量物质。

所述卵黄是为增强驴精子运动力和持久力提供能量补充。

所述HEPES，中文名字是羟乙基哌秦乙硫磺酸，HEPES与五水柠檬酸钠、柠檬酸钾、EDTA结合使用能够较长时间控制稀释液恒定的pH范围，起到缓冲的作用，确保驴精子不会pH的剧烈变化而死亡。其中EDTA的添加使得稀释液的缓冲能力更强，更进一步，还会鳌合溶液中有害的金属离子。

所述BSA，又名牛血清白蛋白，能够稳定精液稀释液的渗透压，保护细胞膜，另外，BSA和脱脂驴奶还能提供蛋白能量物质以及营造良好的驴子宫内环境；

所述A溶液主要增强精子运动能力和持久力，进一步，与BSA搭配使用具有保护驴精子的良好作用，能够保持驴精子的活力，添加了BSA与A溶液的精液稀释液主要用于驴人工授精操作中鲜精受精、常温授精、保鲜授精等技术操作。

所述青链霉素保护驴精子免受精液采集和稀释过程中夹带的微生物和杂质，微生物的代谢会对精液稀释液的品质产生影响。

所述A溶液中牛磺酸：L-赖氨酸盐酸盐：肌醇的质量比为1:1，这样可以最大限度的保护驴精子的活力。

所述驴精液稀释液的配制方法，包括以下步骤：