[发明专利]一种超声波提取中药狗脊中抗肿瘤活性成分的方法

说明书

本发明涉及一种超声波提取中药狗脊中抗肿瘤活性成分的方法，包括如下步骤：(1)将干燥的狗脊粉碎与α‑淀粉酶混匀，置于乙醇溶液中，调pH至5.5‑6.5后，于30‑35℃下，超声提取8‑12小时后，过滤收集滤液，滤液浓缩得浸膏；(2)将步骤(1)得到的浸膏分散于适量的水中，用等体积的乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯相浓缩后，经硅胶柱层析，即得抗肿瘤活性α‑吡喃酮类化合物1和2，所述α‑吡喃酮类化合物具有如下化合物1‑2所示的结构：

技术领域

本发明属于超声提取植物活性成分领域，具体涉及一种超声波提取中药狗脊中抗肿瘤活性成分的方法。

背景技术

狗脊，为蚌壳蕨科金毛狗属植物金毛狗Cibotium barometz(L.)J.Sm.的干燥根茎，是一种中药。据报道，狗脊中含有酚酸类、蕨素类、糖及糖苷等多种化学成分，表现出多种药理活性，例如免疫调节、抗炎、抗肿瘤、降血糖等。本发明利用超声波提取，从狗脊中分离获得一种新型α-吡喃酮类抗肿瘤活性化合物。

发明内容

本发明提供一种抗肿瘤活性α-吡喃酮类化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于所述α-吡喃酮类化合物具有如下化合物1-2所示的结构：

本发明的另一实施方案提供上述抗肿瘤活性α-吡喃酮类化合物1-2的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将干燥的狗脊粉碎与α-淀粉酶混匀，置于乙醇溶液中，调pH至5.5-6.5后，于30-35℃下，超声提取8-12小时后，过滤收集滤液，滤液浓缩得浸膏；

(2)将步骤(1)得到的浸膏分散于适量的水中，用等体积的乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯相浓缩后，经硅胶柱层析，即得化合物1和2。

步骤(1)中所述粉碎优选粉碎至20-100目，α-淀粉酶的用量优选为狗脊质量的0.1％-0.12％，乙醇溶液为体积分数为50-95％乙醇溶液，其用量为每克狗脊使用15-20mL乙醇溶液；超声的频率为30-50kHz。

步骤(2)中所述水优选去离子水或蒸馏水，水的用量优选为狗脊质量的0.6-1.0倍；萃取次数优选1-3次；硅胶柱层析的固定相优选100-200目，200-300目、300-400目硅胶，流动相优选乙酸乙酯、石油醚、甲醇、二氯甲烷或氯仿中的一种或几种混合。

本发明的另一实施方案提供上述抗肿瘤活性α-吡喃酮类化合物1-2或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的另一实施方案提供一种抗肿瘤药物，其特征在于该药物以化合物1、2或其药学上可接受的盐作为有效成分。该药物还可包括其他抗肿瘤活性成分。该药物还任选包括药学上可接受的辅料(优选载体、稀释剂或赋形剂)。所述药物的剂型优选片剂、胶囊或注射剂。

与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明首次在中药狗脊中发现了抗肿瘤活性α-吡喃酮类化合物1-2，扩展了人们对狗脊中的化学成分的认识，有助于人们进一步研究狗脊的药效、作用机制；本发明化合物1-2，尤其是化合物2对HCT116显示出较高的细胞毒活性，有望被开发用于治疗相关肿瘤疾病。

具体实施方式

为了便于对本发明的进一步理解，下面提供的实施例对其做了更详细的说明。但是这些实施例仅供更好的理解发明而并非用来限定本发明的范围或实施原则，本发明的实施方式不限于以下内容。本发明中使用的药材、试剂等均通过商业途径购买，其中α-淀粉酶是商业购买来源于地衣芽孢杆菌的产品。

实施例1

(1)取干燥的狗脊(200g)粉碎至20-100目与α-淀粉酶(200mg)混匀，置于95％乙醇溶液(3.0L)中，调pH至5.5-6.0后，于30℃下，超声提取12小时(超声频率30kHz)后，过滤收集滤液，滤液浓缩得浸膏；