[发明专利]一种用于防治鸡腹泻的益生菌复合活菌制剂及其制备方法在审
| 申请号: | 201911003051.9 | 申请日: | 2019-10-22 |
| 公开(公告)号: | CN110628683A | 公开(公告)日: | 2019-12-31 |
| 发明(设计)人: | 阮晓洋;廖洪;龙谭;赵丽青 | 申请(专利权)人: | 江苏恒丰强生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/16;A61K36/064;A61P1/12;C12R1/25;C12R1/01;C12R1/865;A61K35/747;A61K35/745 |
| 代理公司: | 11411 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 黄冠华 |
| 地址: | 226000 江苏省南*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 制备 冻干粉 益生菌 复合活菌制剂 腹泻 肠道菌群平衡 植物乳酸杆菌 长双歧杆菌 机体免疫力 酿酒酵母菌 肠道菌群 腹泻率 规模化 日增重 肠道 防治 养殖 复配 增殖 抗生素 死亡率 健康 | ||
1.一种用于防治鸡腹泻的益生菌复合活菌制剂,其特征在于:由植物乳酸杆菌菌株、假长双歧杆菌菌株和酿酒酵母菌菌株各自发酵冻干后复配而成,所述植物乳酸杆菌菌株、假长双歧杆菌菌株和酿酒酵母菌菌株的复配比例为10:10:1,所述植物乳酸杆菌和假长双歧杆菌的活菌数不低于1.0×109CFU/g,酵母菌的活菌数不低于1×108CFU/g,余量为葡萄糖。
2.一种如权利要求1所述的用于防治鸡腹泻的益生菌复合活菌制剂的制备方法,其特征在于:经过植物乳酸杆菌冻干粉的制备、假长双歧杆菌冻干粉的制备、酿酒酵母菌冻干粉的制备和复配过程,完成用于防治鸡腹泻的益生菌复合活菌制剂的制备;具体步骤如下:
(1)植物乳酸杆菌冻干粉的制备:
a.各级培养基的配制:
(I)斜面培养基:为PTYG固定培养基,pH值调至7.0,备用;
(II)摇瓶培养基:葡萄糖1.0%,酵母浸粉1.0%,蛋白胨1.0%,L-半胱氨酸盐酸盐0.05%,微量盐4%,pH值调至7.0,备用;
(III)种子罐培养基:葡萄糖1.0%,酵母浸粉2.0%,蛋白胨2.0%,L-半胱氨酸盐酸盐0.05%,微量盐4%,pH控制为6.5,备用;
(IV)发酵罐培养基:葡萄糖2.0%,酵母浸粉2.0%,蛋白胨2.0%,L-半胱氨酸盐酸盐0.05%,微量盐4%,pH控制为6.5,备用;
b.摇瓶菌种扩增:斜面启封后,用灭菌生理盐水还原,按1%的接种量接入摇瓶培养基中,在37℃,静置培养16-18小时,备用;
c.种子罐发酵:取上述摇瓶菌液,按8%的接种量接种于种子罐培养液中,发酵温度为37℃,pH值控制为6.5,搅拌转速50r/min,发酵过程中罐压为0.05MPa,厌氧培养6-8小时,备用;
d.发酵罐发酵:取上述发酵液,按8%的接种量接种于发酵罐培养基中,发酵温度为37℃,pH值控制为6.5,搅拌转速50r/min,厌氧培养14-16小时,罐压为0.05MPa,采用流加方式进行补料,发酵结束后,离心获得菌泥,无菌条件下加入2倍质量的保护剂,混匀、冻干、粉碎、装袋,置于2-8℃条件下,即完成了植物乳酸杆菌冻干粉的制备,备用,所获得的植物乳酸杆菌冻干粉的活菌数不低于1.0×109CFU/g;
(2)假长双歧杆菌冻干粉的制备:
a.各级培养基的配制:
(I)斜面培养基:为PTYG固定培养基,pH值调至7.4,备用;
(II)摇瓶培养基:葡萄糖1.0%,酵母浸粉1.0%,蛋白胨1.0%,L-半胱氨酸盐酸盐0.05%,微量盐4%,pH值调至7.4,备用;
(III)种子罐培养基:葡萄糖1.0%,酵母浸粉2.0%,蛋白胨2.0%,L-半胱氨酸盐酸盐0.05%,微量盐4%,pH控制为6.5,备用;
(IV)发酵罐培养基:葡萄糖2.0%,酵母浸粉2.0%,蛋白胨2.0%,L-半胱氨酸盐酸盐0.05%,微量盐4%,pH控制为6.5,备用;
b.摇瓶菌种扩增:斜面启封后,用灭菌生理盐水还原,按1%的接种量接入摇瓶培养基中,在37℃,静置培养16-18小时,备用;
c.种子罐发酵:取上述摇瓶菌液,按8%的接种量接种于种子罐培养液中,发酵温度为37℃,pH值控制为6.5,搅拌转速50r/min,发酵过程中罐压为0.05MPa,厌氧培养6-8小时,备用;
d.发酵罐发酵:取上述发酵液,按8%的接种量接种于发酵罐培养基中,发酵温度为37℃,pH值控制为6.5,搅拌转速50r/min,厌氧培养14-16小时,罐压为0.05MPa,采用流加方式进行补料,发酵结束后,离心获得菌泥,无菌条件下加入2倍质量的保护剂,混匀、冻干、粉碎、装袋,置于2-8℃条件下,即完成了假长双歧杆菌冻干粉的制备,备用,所获得的假长双歧杆菌冻干粉的活菌数不低于1.0×109CFU/g;
(3)酿酒酵母菌冻干粉的制备:
a.各级培养基的配制:
(I)斜面培养基:为PTYG固定培养基,pH值调至6.5,备用;
(II)摇瓶培养基:葡萄糖1.0%,酵母浸粉1.0%,蛋白胨1.0%,微量盐4%,pH值调至6.5,备用;
(III)种子罐培养基:葡萄糖2.0%,酵母浸粉1.5%,蛋白胨1.5%,微量盐4%,pH控制为6.0,备用;
(IV)发酵罐培养基:葡萄糖2.0%,酵母浸粉1.5%,蛋白胨1.5%,微量盐4%,pH控制为6.0,备用;
b.摇瓶菌种扩增:斜面启封后,用灭菌生理盐水还原,按1%的接种量接入摇瓶培养基中,在37℃,静置培养16-18小时,备用;
c.种子罐发酵:取上述摇瓶菌液,按8%的接种量接种于种子罐培养液中,发酵温度为37℃,pH值控制为6.5,搅拌转速50r/min,发酵过程中罐压为0.05MPa,厌氧培养6-8小时,备用;
d.发酵罐发酵:取上述发酵液,按8%的接种量接种于发酵罐培养基中,发酵温度为37℃,pH值控制为6.5,搅拌转速50r/min,厌氧培养14-16小时,罐压为0.05MPa,采用流加方式进行补料,发酵结束后,离心获得菌泥,无菌条件下加入2倍质量的保护剂,混匀、冻干、粉碎、装袋,置于2-8℃条件下,即完成了酿酒酵母菌冻干粉的制备,备用,所获得的酿酒酵母菌冻干粉的活菌数不低于1.0×108CFU/g;
(4)复配:将制备得到的植物乳酸杆菌冻干粉、假长双歧杆菌冻干粉和酿酒酵母菌冻干粉按照10:10:1比例进行混合,即完成了用于防治鸡腹泻的益生菌复合活菌制剂的制备。
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