[发明专利]一种用于早期宫颈癌检测的组合物及试剂盒

说明书

本发明公开了一种用于早期宫颈癌检测的组合物及试剂盒，该组合物包括EPB41L3基因中3个发生高度甲基化的CpG岛区域和JAM3基因中3个发生高度甲基化的CpG岛区域的扩增引物，能覆盖98％以上不同型别宫颈癌，可以实现一管反应检测多基因多甲基化区域的检测。优选配合特定的MGB探针和简并封闭引物，进一步提高了灵敏度和精准性。整个检测过程无创伤、操作简便、易于判读，通用的qPCR设备即可满足检测，PCR过程采用全封闭形式，避免了交叉污染的可能，同时对两个标志物的三个区段进行检测，结果更加精准，综上因素使该发明具有社会推广性。该检测的高灵敏性适用于无创宫颈癌早期筛查。

技术领域

本发明涉及核酸体外诊断领域，尤其是一种用于早期宫颈癌检测的组合物，通过检测特定的基因甲基化对宫颈癌进行早期筛查及其辅助诊断。

背景技术

宫颈癌是世界女性第四大易发癌种，2018年约567,600新增病例，同时也是第四位的致死癌种，2018年约有315,000死亡病例。在中国，宫颈癌是目前第五大女性易发癌种，2018年有106,430新增病例，同时在15-44岁女性中是第三大致死癌种。

人乳头瘤病毒(HPV，全称为human papillomavirus)是绝大多数宫颈癌发生的元凶，在大约95％的恶性宫颈病变中能鉴别出HPV的基因组DNA。人一生中累积的HPV感染风险高达80％，但大多数的HPV感染只是暂时的，可以通过人体自身的免疫调节被自发地清除掉。小于10％的人群出现HPV超过两年的持续性感染，这种持续性感染通常与高危型HPV病毒有关。15种主要高危型HPV病毒包括HPV 16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68，73，以及82。高危型HPV病毒被认为与宫颈上皮内瘤病变(CIN，全称为cervicalintraepithelial neoplasia)相关，并最终导致宫颈癌的形成。在15种高危型HPV病毒中，HPV-16是最致癌的种类，是一半宫颈癌发生的主要原因。HPV-18，在许多子宫颈内腺癌中被提及，是第二大致癌类型，在所有的宫颈癌中约占了15％的比例。HPV-31和HPV-33是另外两种常见的类型，约占了8％。

目前，接种宫颈癌疫苗是预防HPV病毒的主要手段。HPV疫苗包括2价疫苗(HPV-16和HPV-18)，4价疫苗(HPV-16，HPV-11，HPV-16，以及HPV-18)，以及9价疫苗(HPV-6，HPV-11，HPV-16，HPV-18，HPV-31，HPV-33，HPV-45，HPV-52，以及HPV-58)。接种HPV疫苗可以预防大于95％的HPV病毒感染，但疫苗的价格较高，且受年龄和区域的限制，同时所有商业疫苗都是预防性的，对已经感染的群体无治疗效果。