[发明专利]一种生产卟啉类化合物的重组菌及生产卟啉类化合物的方法有效
申请号: | 201910999107.4 | 申请日: | 2019-10-21 |
公开(公告)号: | CN112760275B | 公开(公告)日: | 2023-06-06 |
发明(设计)人: | 张璐;张立新;谭高翼;陈海红;朱国良;王科峰;李川;周立铭;石桐;刘乐诗 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12P17/18;C12R1/01 |
代理公司: | 北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290 | 代理人: | 王芬;张淑珍 |
地址: | 200237 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生产 卟啉 化合物 重组 方法 | ||
1.一种重组菌,相比出发菌株,所述重组菌具有表达水平降低的调节子FnrL,并具有导入的编码血红素合成酶AhbD的表达盒,其中,所述出发菌株为类球红细菌,其中,所述调节子FnrL的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述AhbD的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。
2.如权利要求1所述的重组菌,其中,所述出发菌株为野生型菌株、基因工程菌株和/或化学诱变菌株。
3.如权利要求1所述的重组菌,其中,所述重组菌包含具有修饰的调节子FnrL,所述修饰包括调节子FnrL的氨基酸序列中的一个或多个氨基酸残基的置换、插入和/或缺失,以使相比出发菌株而言调节子FnrL的表达水平降低。
4.如权利要求3所述的重组菌,其中,所述重组菌具有部分或全部氨基酸残基缺失的调节子FnrL,以使相比出发菌株而言调节子FnrL的表达水平降低。
5.如权利要求3所述的重组菌,其中,相比出发菌株,所述重组菌具有使FnrL的表达水平降低的一个或多个氨基酸置换或插入。
6.如权利要求1或2所述的重组菌,其中,所述重组菌包含具有修饰的fnrL基因,所述修饰包括fnrL基因的核苷酸序列中的一个或多个碱基的置换、插入和/或缺失,以使相比出发菌株而言调节子FnrL的表达水平降低。
7.如权利要求6所述的重组菌,其中,所述重组菌具有部分或全部碱基缺失的fnrL基因,以使相比出发菌株而言调节子FnrL的表达水平降低。
8.如权利要求6所述的重组菌,其中,相比出发菌株,所述重组菌具有使FnrL的表达水平降低的一个或多个碱基置换或插入。
9.如权利要求1或2所述的重组菌,其中,相比出发菌株,所述重组菌包含具有修饰的调控fnrL基因表达的元件,所述修饰包括fnrL基因表达的调控元件中的一个或多个碱基的置换、插入和/或缺失,以使调节子FnrL的表达水平降低。
10.如权利要求1或2所述的重组菌,其中,所述重组菌为编码所述调节子FnrL的基因被敲除的重组菌。
11.如权利要求1或2所述的重组菌,其中,所述编码AhbD的多核苷酸序列为密码子优化的。
12.如权利要求1或2所述的重组菌,其中,所述编码血红素合成酶AhbD的表达盒整合进宿主细胞的基因组中,或者处于游离型质粒中。
13.一种如权利要求1-12中任一项所述的重组菌的制备方法,所述方法包括:使出发菌株中的调节子FnrL的表达水平降低,并向所述出发菌株中导入编码血红素合成酶AhbD的表达盒,其中,所述出发菌株为类球红细菌。
14.如权利要求13所述的方法,其中,将所述出发菌株中编码调节子FnrL的基因敲除,从而使所述出发菌株中的所述调节子FnrL的调控能力降低。
15.一种活菌制剂,其中,包含如权利要求1-12中任一项所述的重组菌。
16.如权利要求1-12中任一项所述的重组菌或如权利要求15所述的活菌制剂在制备卟啉类化合物中的用途,其中,所述卟啉类化合物选自粪卟啉Ⅲ、Fe-粪卟啉Ⅲ和血红素中的一种或多种。
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