[发明专利]一种肉牛繁殖胚胎冷冻保存液及冷冻方法在审
| 申请号： | 201910998213.0 | 申请日： | 2019-10-21 |
| 公开（公告）号： | CN110604128A | 公开（公告）日： | 2019-12-24 |
| 发明（设计）人： | 张广志 | 申请（专利权）人： | 内蒙古金草原牧业有限公司 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 13130 石家庄领皓专利代理有限公司 | 代理人： | 薛琳 |
| 地址： | 010000 内蒙古自治区呼和浩*** | 国省代码： | 内蒙;15 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 冷冻 胚胎冷冻保存 肉牛 冷冻保存液 冷冻载体 繁殖 牛血清白蛋白 聚乙烯亚胺 冷冻存活率 细胞 谷氨酰胺 冷冻保存 胚胎冷冻 山梨糖醇 蔗糖 缓冲液 牛胚胎 平衡液 重量份 平衡 放入 液氮 | ||
1.一种肉牛繁殖胚胎冷冻保存液，其特征在于，所述冷冻保存液由以下重量份的组分组成：
HPES缓冲液40～50份，牛血清白蛋白0.1～0.5份，山梨糖醇2～5份，谷氨酰胺0.01～0.02份，聚乙烯亚胺10～15份，蔗糖20～25份。
2.根据权利要求1所述的一种肉牛繁殖胚胎冷冻保存液，其特征在于，所述冷冻保存液由以下重量份的组分组成：
HPES缓冲液45份，牛血清白蛋白0.3份，山梨糖醇3份，谷氨酰胺0.015份，聚乙烯亚胺12份，蔗糖23份。
3.根据权利要求1或2所述的一种肉牛繁殖胚胎冷冻保存液，其特征在于，所述聚乙烯亚胺的分子量为70000。
4.一种肉牛繁殖胚胎冷冻方法，其特征在于，包括下述步骤：将准备冷冻的牛胚胎先在预平衡液中平衡5～8min，再放入权利要求1～3任意一项所述的一种肉牛繁殖胚胎冷冻保存液中平衡30～40秒后转移至冷冻载体上，将冷冻载体投入液氮中进行冷冻。
5.根据权利要求4所述的一种肉牛繁殖胚胎冷冻方法，其特征在于，在将在预平衡液中平衡5～8min后的牛胚胎放入所述冷冻保存液中前，先将所述冷冻保存液预热至37～40℃。
6.根据权利要求4所述的一种肉牛繁殖胚胎冷冻方法，其特征在于，所述冷冻载体为OPS。
7.根据权利要求4所述的一种肉牛繁殖胚胎冷冻方法，其特征在于，所述预平衡液有以下重量份的组分组成：
HPES缓冲液45份，牛血清白蛋白0.4份，谷氨酰胺0.03份，聚乙烯亚胺15份。
8.据权利要求4～7任意一项所述的一种肉牛繁殖胚胎冷冻方法，其特征在于，所述牛胚胎为囊胚、2-细胞胚胎、4-细胞胚胎或8-细胞胚胎。
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