[发明专利]诺如病毒的检测方法

权利要求书

1.一种诺如病毒的检测方法，将待检体处理液和一步法RT-PCR反应液的混合液与待检体混合，通过RT-PCR反应来检测待检体中的诺如病毒，所述混合液还包含二甲基亚砜(DMSO)。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述诺如病毒基因型为基因组I(GI)或基因组II(GII)。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述待检体源自选自由生物试样、生物来源试样、环境试样和环境来源试样组成的组中的试样。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述待检体源自选自由排泄物试样、排泄物来源试样、呕吐物和呕吐物来源试样组成的组中的试样。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述待检体为将权利要求4所述的试样悬浮于水、生理盐水或缓冲液中而得到的悬浮液。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述待检体为对权利要求5所述的悬浮液进行离心分离而得到的离心上清。

7.根据权利要求1～6中的任一项所述的方法，其中，所述待检体处理液为利用了探针法的诺如病毒检测试剂盒所包含的样品处理试剂(Sample Treatment Reagent)，所述一步法RT-PCR反应液为所述试剂盒所包含的NoV试剂(NoV Reagent)A、B和C的混合物、是包含逆转录酶和DNA聚合酶的反应液，所述试剂盒为岛津制作所的产品编号241-09325系列试剂盒。

8.根据权利要求1～7中的任一项所述的方法，其中，所述待检体处理液与所述一步法RT-PCR反应液的混合比以体积比计为3：4～6。

9.根据权利要求1～8中的任一项所述的方法，其中，在所述待检体处理液与所述一步法RT-PCR反应液的混合液中以1～5％(v/v)的浓度包含所述DMSO。

10.根据权利要求1～9中的任一项所述的方法，其中，所述待检体与还包含DMSO的前述混合液的混合比以体积比计为1：20～30。

11.根据权利要求7所述的方法，其中，所述逆转录酶选自由AMV逆转录酶、MMLV逆转录酶、HIV逆转录酶以及它们的突变体组成的组。

12.根据权利要求7所述的方法，其中，所述DNA聚合酶选自由Taq DNA聚合酶、Tth DNA聚合酶、KOD DNA聚合酶、Pfu DNA聚合酶以及它们的突变体组成的组。

13.根据权利要求1～12中的任一项所述的方法，其中，所述RT-PCR反应通过实时测定而监测。

14.根据权利要求13中的任一项所述的方法，其中，所述实时测定通过使用荧光滤光片测定RT-PCR产物的扩增曲线，给出判定待检体中的诺如病毒的存在为阳性、或为阴性的结果。

15.一种诺如病毒的检测试剂盒，其是如下构成的：

其包含：待检体处理液、以及含有逆转录酶和DNA聚合酶的一步法RT-PCR反应液，所述待检体处理液与所述一步法RT-PCR反应液的混合液中含有1～5％(v/v)的DMSO。

16.根据权利要求15所述的试剂盒，其判定诺如病毒基因型为基因组I(GI)或为基因组II(GII)。

17.根据权利要求15或16所述的试剂盒，其还包含试剂盒的操作步骤说明书。