[发明专利]一株产丁二酸的大肠杆菌基因工程菌及其构建方法与应用

权利要求书

1.产丁二酸的大肠杆菌基因工程菌在制备丁二酸中的应用，所述大肠杆菌基因工程菌保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO：M2018743，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，保藏日期为2018年11月01日。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产丁二酸的大肠杆菌基因工程菌利用微生物电化学系统还原富马酸制备丁二酸。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产丁二酸的大肠杆菌基因工程菌利用微生物电化学装置制备丁二酸，具体步骤如下：

（1）活化大肠杆菌基因工程菌；

（2）将步骤（1）活化的大肠杆菌基因工程菌接种到2×YT液体培养基中20～37 ℃培养；

（3）将步骤（2）得到的菌体接种于微生物电化学装置的阴极室中，持续向阴极室通入CO₂使其保持无氧状态；在外加电压作用下，重组大肠杆菌以阴极室中的富马酸为底物，催化富马酸发生还原反应生成丁二酸；

步骤（3）中，所述外加电压的范围为-0.4～-0.8Vvs.参比电极，反应温度为30～37 ℃，反应时间为20～48h；

所述微生物电化学装置包括由质子交换膜隔开的阳极室和阴极室，位于阳极室的阳极、阳极液通过电源和位于阴极室的阴极、阴极液形成闭合回路；所述阴极室还设有进气口和出气口；所述阴极室还设有参比电极，所述参比电极为Ag/AgCl电极或甘汞电极。