[发明专利]一种高效毛细管电泳检测系统及用途

说明书

本发明提供了一种高效毛细管电泳检测系统及检测方法和用途。所述检测系统包括：分离缓冲液瓶、两端电极、前端毛细管、连接器、后端毛细管、高压电源、信号放大装置、电流检测器、紫外检测器、二极管阵列检测器或激光诱导荧光检测器。所述检测系统在使用一种或同时使用多种检测器的情况下，适用于无机化合物、氨基酸、糖类、肽类、蛋白质、脂类、DNA、RNA、有机小分子等物质的定性定量分析、分子间相互作用以及药物筛选等。

技术领域

本发明涉及检测技术领域，涉及高效毛细管电泳新模式的构建、检测新方法的研究及其的应用，尤其涉及此新系统在同时使用电流检测器与紫外检测器/二极管阵列检测器/激光诱导荧光检测器的情况下，对无紫外吸收或紫外吸收较弱的无机化合物、氨基酸、糖类、肽类、蛋白质、脂类、DNA、RNA、有机小分子等物质的定性定量分析、分子间相互作用定性定量分析以及药物筛选等方面的应用。

背景技术

日渐复杂的生物样品以及多样化的定性定量分析需求，给分析化学及仪器分析提出了越来越高的挑战。在众多分析方法中，高效毛细管电泳(High Performance CapillaryElectrophoresis,HPCE)以其快速、高效、自动化、灵敏度高、样品消耗量少等优点得到了广泛的应用。在现有的HPCE检测器中，紫外检测器应用最为广泛，被测物有良好的紫外吸收就能被检测器捕获；荧光检测器最为灵敏，需要被测物能够发射荧光；质谱检测器最为广谱，但是仪器巨大、价格高昂等原因限制了其广泛应用；常规的电化学检测器需要被测物能够发生氧化还原反应，虽然较为灵敏，但存在检测器容易被污染等缺点。目前，HPCE仪最常配置的检测器为紫外检测器、二级阵列管检测器和荧光检测器，当被测物质缺少良好的紫外吸收时，往往不能利用这三种检测器直接进行测定，而是需要事先经过一个衍生化的过程，带上紫外吸收基团或者荧光基团后，才能被检测器捕获产生信号。但是衍生化的过程操作较为繁琐，并且被测物经衍生化后，结构发生改变，从而不能得到真实的被测物的信息。因此，研究并发展一种新的检测方法，使得紫外吸收较差或无紫外吸收的物质不用经过衍生化就能够直接被定性定量分析是十分重要的。

HPCE技术在生物医药领域得到了广泛的应用，尤其在药物筛选及研究分子间相互作用方面展现了较好的应用前景。在抗肿瘤药物筛选的工作中，前人将肿瘤细胞表面特定蛋白受体提取分离之后，再将其作为固定相，采用HPCE进行分子间相互作用研究，成功筛选出与特定蛋白受体有相互作用的先导化合物。但是在实际工作中，肿瘤细胞表面的疏水性跨膜受体蛋白不易获得，且在提取、分离、纯化过程中容易发生蛋白变性以至于改变了蛋白原有的空间结构和生物活性，这常常导致在后续的药物筛选工作中出现假阳性和假阴性结果。若能不经过受体蛋白的提取、分离和纯化过程，直接获得保持原构象的特定受体蛋白，将为后续的药物筛选工作带来巨大的优势。此外，传统中药在肿瘤治疗中发挥着重要作用。经过多年临床实践，传统中药可以从提高机体免疫功能、减轻放化疗毒副作用、抑制肿瘤细胞增殖、逆转多药耐药等多个方面起到抗肿瘤作用。然而，中药制剂成分复杂多样、药效成分不够准确清晰等导致其在临床应用上一直面临着不小的挑战。若能明确这些中药混合物的有效成分，精简其制剂中的无效成分或毒性成分，将为众多中药混合制剂带来新的发展。

发明内容

本发明提供了一种高效毛细管电泳检测系统及检测方法和用途。本发明通过搭建无筛不同内径毛细管串接接口(Tandem Connection of Different Diameter Capillary，TCIDDC)或有筛不同内径毛细管串接接口(Tandem Connection of Different DiameterCapillary with Mesh，TCIDDCM)，联用电流检测器(Current Detector，CRD)、紫外-可见光检测器(UV Detector，UVD)、二极管阵列检测器(Photodiode array tube detector，DAD)、激光诱导荧光检测器(Laser Induced Fluorescence Detector，LIF)，创造了一类全新的HPCE检测系统。