[发明专利]一种基于等离激元金纳米囊泡的超灵敏细菌鉴定方法有效
申请号: | 201910975636.0 | 申请日: | 2019-10-15 |
公开(公告)号: | CN110726768B | 公开(公告)日: | 2022-04-12 |
发明(设计)人: | 乔亮;易佳;王新军;刘宝红 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | G01N27/64 | 分类号: | G01N27/64;G01N1/28 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 张磊 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 离激元金 纳米 灵敏 细菌 鉴定 方法 | ||
1.一种基于等离激元金纳米囊泡的超灵敏细菌鉴定方法,其特征在于具体步骤如下:
(1)将细菌样品和基质溶液混合均匀;所述基质溶液由α-氰基-4-羟基肉桂酸、乙腈、三氟乙酸和去离子水组成的混合溶剂配制而成,其中:乙腈、三氟乙酸和去离子水的体积比为50:2.5:47.5;α-氰基-4-羟基肉桂酸为饱和溶液;
(2)合成由全氟癸基硫醇修饰的金纳米粒子溶胶;
(3)将步骤(1)得到的和基质溶液混合均匀的细菌样品加到步骤(2)合成的溶胶中,振荡乳化,得到包封了细菌样品的等离激元金纳米囊泡,将单颗囊泡移出点至靶板,得到与激光光斑大小接近的样品点;
(4)采用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)对步骤(3)得到的样品点进行分析,得到细菌质谱图;
(5)将步骤(4)得到的细菌质谱图与标准细菌质谱数据库进行比对,得出鉴定结果。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)中所述全氟癸基硫醇修饰的金纳米粒子直径为25-35纳米,浓度为35皮摩尔每升。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)中所述等离激元金纳米囊泡的尺寸为20~500微米。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中细菌样品与基质溶液采用涡旋混匀仪混合均匀。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(5)中所述标准细菌质谱数据库为Biotyper微生物数据库或VITEK MS数据库中任一种。
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