[发明专利]一种用于组胺快速检测的比色条、比色卡和检测方法有效
申请号: | 201910975115.5 | 申请日: | 2019-10-14 |
公开(公告)号: | CN110672596B | 公开(公告)日: | 2022-02-22 |
发明(设计)人: | 高志贤;韩殿鹏;彭媛;李双;白家磊;吴瑾;宁保安;李巧凤 | 申请(专利权)人: | 军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;G01N21/01 |
代理公司: | 北京思创大成知识产权代理有限公司 11614 | 代理人: | 高爽 |
地址: | 300050*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 组胺 快速 检测 比色 方法 | ||
1.一种用于组胺快速检测的比色条,其特征在于,该比色条由包括以下步骤的方法制得:
(1)制备PDA囊泡
将10,12-二十五碳二炔酸、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱与有机溶剂混合并搅拌,然后蒸发所述有机溶剂,加入超纯水溶解后进行超声分散,随后将分散液低温避光保存;然后经紫外照射进行聚合,得到PDA囊泡分散液;10,12-二十五碳二炔酸与二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱的摩尔比为7/3;所述紫外照射的条件包括:254nm紫外光,照射20min;
(2)组装检测比色条
将吸附载体固定在底板上,将含有0.5%海藻糖的PDA囊泡分散液作为显色指示液滴加在吸附载体上,得到所述比色条。
2.根据权利要求1所述的比色条,其中,步骤(1)中,
所述10,12-二十五碳二炔酸与有机溶剂的质量体积比为2-5mg/ml;
所述超纯水的加入量使得10,12-二十五碳二炔酸与超纯水的质量体积比为1-3mg/ml;
所述有机溶剂为氯仿和/或二氯甲烷;
所述蒸发溶剂所用设备选自旋转蒸发仪和氮吹仪中的一种;
所述吸附载体选自滤纸、玻璃纤维素膜、硝酸纤维素膜、聚酯纤维素膜和聚偏二氟乙烯膜中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的比色条,其中,步骤(1)中,所述搅拌的条件包括:室温下避光搅拌1-3h;
所述超声分散的条件包括:用超声波破碎仪在70-90℃下超声分散10-30min;
所述低温避光保存的条件包括:避光置于4-6℃冰箱保存6-24h。
4.根据权利要求1所述的比色条,其中,步骤(2)中,将显色指示液滴加在吸附载体上后,还包括平衡步骤,所述平衡步骤的条件包括:在25-30℃平衡1-9min。
5.一种用于组胺快速检测的比色卡,该比色卡利用权利要求1-4中任意一项所述的比色条制得,包括以下步骤:配制不同浓度的组胺标准溶液,分别滴加于所述比色条上,孵育后记录颜色,根据反应颜色的深浅及色阶的变化制作标准比色卡。
6.根据权利要求5所述的比色卡,其中,所述孵育的条件包括:温度为24-26℃,时间为4-6min。
7.一种肉制品中组胺的快速检测方法,该方法采用权利要求5或6所述的比色卡进行,包括:
(1)绘制比色条检测组胺标准曲线
配制不同浓度的组胺标准溶液,分别滴加于比色条上,孵育后记录颜色;利用图像处理软件对组胺响应后的颜色进行处理和分析,以不同组胺浓度为横坐标,颜色值为纵坐标,绘制标准曲线;
(2)样品检测,包括以下方式中的至少一种:
方式一:将肉制品进行前处理所得的水溶性处理液滴加于比色条上,孵育后与权利要求5或6所述的标准比色卡的颜色进行对比,实现对肉制品中组胺浓度的半定量检测;
方式二:将肉制品进行前处理所得的水溶液处理液滴加于比色条上,孵育后,根据步骤(1)得到的标准曲线,计算肉制品中组胺浓度,实现对肉制品中组胺浓度的定量检测;
方式三:将比色条放入密闭空间内的肉制品附近,观察比色条颜色的变化,与权利要求5或6所述的标准比色卡的颜色进行对比,进行实时监测。
8.根据权利要求7所述的肉制品中组胺的快速检测方法,其中,步骤(1)中,对颜色进行处理和分析并绘制标准曲线的步骤包括:将颜色的RGB图像分离各通道为灰度图,反转图像进行校准,调整阈值为红色,选择分析测量的区域和数据为所选阈值和平均灰度,依次测定不同比色条的相同显色区域即得到各个比色条的平均灰度值,以不同组胺浓度为横坐标,平均灰度值为纵坐标,绘制标准曲线。
9.根据权利要求7所述的肉制品中组胺的快速检测方法,其中,步骤(2)中,所述前处理包括:将肉制品均质搅碎,加入水充分搅拌,之后过滤、离心,得到水溶性处理液。
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