[发明专利]一种含肉桂醛的化妆品致敏性的检测方法

权利要求书

1.一种含肉桂醛的化妆品致敏性的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：将待测化妆品样品溶液和多肽贮备液反应，通过液相色谱测试多肽反应前后的响应值，计算多肽的消耗百分比，从而判断致敏性；

所述多肽贮备液包括半胱氨酸多肽贮备液和赖氨酸多肽贮备液；

所述液相色谱的色谱柱的内径为4.6 mm，长度为150 mm，粒径为3.5 μm；

所述液相色谱的流动相包括水和乙腈，所述水为含0.1%三氟乙酸的水溶液，所述乙腈为含0.085%三氟乙酸的乙腈溶液；

所述液相色谱采用的洗脱方式为梯度洗脱；

所述梯度洗脱的流程为：以水和乙腈的体积加和为100%计，在第0-10 min内，水的体积百分含量由87%连续降低至64%，乙腈的体积百分含量由13%连续增大至36%；第10-11 min内，水的体积百分含量由64%连续降低至10%，乙腈的体积百分含量由36%连续增大至90%；第11-14 min内，水的体积百分含量恒定为10%，乙腈的体积百分含量恒定为90%；第14-14.5min内，水的体积百分含量由10%连续增加至87%，乙腈的体积百分含量由90%连续降低至13%；第14.5-22 min内，水的体积百分含量恒定为87%，乙腈的体积百分含量恒定为13%；

所述半胱氨酸多肽贮备液的制备方法包括：将半胱氨酸多肽用pH为7.5±0.5的磷酸盐缓冲液配制成浓度为0.667 mmol/L的半胱氨酸多肽贮备液；

所述半胱氨酸多肽的纯度为90-99.9%；

所述pH为7.5±0.5的磷酸盐缓冲液的配置方法包括：取浓度为0.1mol/L磷酸二氢钠溶液与浓度为0.1mol/L磷酸氢二钠溶液混合，得到pH为7.5±0.5的磷酸盐缓冲液；

以磷酸二氢钠溶液的添加体积为18 mL计，所述磷酸氢二钠溶液的添加体积为82mL；

所述赖氨酸多肽贮备液的制备方法包括：将赖氨酸多肽用pH为10.2的醋酸铵缓冲液配制成浓度为0.667mmol/L的赖氨酸多肽贮备液；

所述赖氨酸多肽的纯度为90-99.9%；

所述pH为10.2的醋酸铵缓冲液的配置方法包括：将醋酸铵加水溶解，用氨水调节pH值，得到pH为10.2的醋酸铵缓冲液；

以醋酸铵的添加量为1.542 g计，所述水的添加体积为200 mL；

所述待测化妆品样品溶液包括水、甘油、黄原胶、矿油、鲸蜡硬脂醇、氢化聚异丁烯、聚二甲基硅氧烷、鲸蜡醇、甘油硬脂酸酯、PEG-75 硬脂酸酯、鲸蜡醇聚醚-20、硬脂醇聚醚-20、苯氧乙醇、乙基己基甘油、羟苯甲酯、羟苯乙酯、丙二醇。

2.根据权利要求1所述的含肉桂醛的化妆品致敏性的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括：

（1）将待测化妆品样品溶液和半胱氨酸多肽储备液反应，用液相色谱测试反应前后半胱氨酸多肽的响应值，计算半胱氨酸多肽的消耗百分比；

（2）将待测化妆品样品溶液和赖氨酸多肽储备液反应，用液相色谱测试反应前后赖氨酸多肽的响应值，计算赖氨酸多肽的消耗百分比；

（3）将步骤（1）得到的半胱氨酸多肽的消耗百分比和步骤（2）得到的赖氨酸多肽的消耗百分比取平均值M，根据平均值M判断含肉桂醛的化妆品的致敏性。

3.根据权利要求2所述含肉桂醛的化妆品致敏性的检测方法，其特征在于，步骤（1）中所述反应包括：取750 μL半胱氨酸多肽贮备液、200 μL乙腈和50 μL待测化妆品样品溶液混合反应。

4. 根据权利要求2所述含肉桂醛的化妆品致敏性的检测方法，其特征在于地，步骤（2）中所述反应包括：取750 μL赖氨酸多肽贮备液和250 μL待测化妆品样品溶液混合反应。

5.根据权利要求1所述的含肉桂醛的化妆品致敏性的检测方法，其特征在于，所述反应为避光反应。

6.根据权利要求1所述含肉桂醛的化妆品致敏性的检测方法，其特征在于，所述反应的时间为15-24 h。

7.根据权利要求1所述含肉桂醛的化妆品致敏性的检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括将反应后得到的反应物进行分离。