[发明专利]一种具有生物活性的纳米微球的制备方法

说明书

本发明涉及纳米凝胶材料领域，尤其涉及一种具有生物活性的纳米微球的制备方法。所述方法包括：将海藻酸钠和聚古罗糖醛酸溶于溶剂，加入活化剂进行活化得到活化液，将活化液与钙盐溶液混合，再加入氨基巯醇，置于含氧气氛中进行自交联，即得到具有生物活性的纳米微球。本发明制备方法简洁高效；能够一步法直接制备得到纳米微球；所制得的纳米微球具有良好的载药性和靶向给药性；在聚古罗糖醛酸的配合作用下纳米微球具备了激发生物体免疫反应的能力。

技术领域

本发明涉及纳米凝胶材料领域，尤其涉及一种具有生物活性的纳米微球的制备方法。

背景技术

海藻酸钠是褐藻中提取的一种天然聚阴离子多糖海藻酸的钠盐，是由M单元(甘露糖醛酸)和G单元(古洛糖醛酸)以1,4一糖苷键的形式连接，并由一定比例的MM、GM、GG片段构成的无规嵌段共聚物。聚古罗糖醛酸是褐藻胶的低聚产物，具有激活巨噬细胞的作用，配合聚古罗糖醛酸，在钙离子和交联剂的作用下制备肿瘤靶向的纳米球，不仅可以载化疗药物，基质本身在肿瘤部位分解成低聚古罗糖醛酸也有激活肿瘤微环境免疫系统的功能。

因为海藻酸钠骨架链上存在大量的羧基，该羧基极易与二价的阳离子发生离子间的相互作用，因此可通过加入二价阳离子形成乳白色的水凝胶。Ca²⁺易与枸橼酸、磷酸、乳酸、EDC等螯合而从凝胶网络脱离，或在高浓度的Na⁺或M9²⁺溶液中与周围离子发生交换而使凝胶的网络结构解体，导致此类凝胶的性能不稳定。所以，Ca²⁺引导交联的水凝胶在生理介质中易于逐渐溶解而失去凝胶特性。要解决Ca²⁺引导交联水凝胶存在的问题，除了可采用化学交联法制备外，还可以应用聚阳离子电解质与海藻酸钠作用形成强电解质的结构来解决。

中国专利局于2013年2月6日公开了一种原位交联海藻酸钠水凝胶及其制备方法的发明专利授权，授权公开号为CN102408496B，其采用活化海藻酸钠后配合含氨基的有机物形成酰胺键，进而在氧化条件下进行自交联的方式对水凝胶进行制备。但是，该方案制备凝胶需要模具配合，无法直接实现纳米微球的制备。

发明内容

为解决现有以海藻酸钠为主要原料制备凝胶时需要配合模板、模具等进行制备，无法简单高效地制备得到纳米微球，以及部分纳米微球载药性差、无法实现靶向给药等问题，本发明提供了一种具有生物活性的纳米微球的制备方法。本发明的目的在于：一、简化制备工艺，能够简单高效地制备得到海藻酸钠纳米微球；二、所制得的纳米微球具有良好的载药性，并能够实现靶向给药；三、通过各组分的配合，使其产生良好的生物活性，能够激活生物体本身的免疫反应。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案。

一种具有生物活性的纳米微球的制备方法，

所述方法包括以下步骤：

将海藻酸钠和聚古罗糖醛酸溶于溶剂，加入活化剂进行活化得到活化液，将活化液与钙盐溶液混合，再加入氨基巯醇，置于含氧气氛中进行自交联，即得到具有生物活性的纳米微球。

在上述方法中，首先对海藻酸钠和聚古罗糖醛酸进行活化，活化后加入钙盐溶液，利用钙盐溶液提供二价阳离子作为核心，在钙离子的交联作用下能够直接形成纳米微球，无需配合模具或模板可直接快速地成型。此外，氨基巯醇和海藻酸钠会形成巯基化海藻酸钠，巯基化海藻酸钠在含氧气氛中本身就能够进行自交联反应形成凝胶，而再进一步配合钙离子引发的离子交联反应，能够一步形成纳米微球。同样，聚古罗糖醛酸也会参与交联，形成海藻酸钠和聚古罗糖醛酸复合的纳米微球，海藻酸钠主要用于载药以及靶向给药，而聚古罗糖醛酸则可有效激发生物体的免疫反应，提高药物治疗的效果。

作为优选，

所述活化剂为碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺。