[发明专利]一种女贞子生品和酒制品的鉴别方法

说明书

本发明涉及一种女贞子生品和酒制品的鉴别方法。所述鉴别方法以10‑羟基‑木樨榄苷二甲酯、新女贞苷或异构体、8‑demethyl‑7‑ketologanin、elenolic acid、毛蕊花糖苷、木樨草素中的一种或至少两种作为标志物；以橄榄苦苷糖苷配基为内标；以超高效液相色谱/四极杆‑轨道阱质谱对待测样品进行检测。本发明首先选取了标志物及内标，可有效将女贞子的生品和酒制品进行区分。进一步提供了采用超高效液相色谱/四极杆‑轨道阱质谱(UHPLC/Q‑Orbitrap‑MS)对样品进行分离和检测，可有效分离女贞子样品并进行检测，即可准确判断样品是否为生品或酒制品。

技术领域

本发明涉及药材检测技术领域，特别是涉及一种女贞子生品和酒制品的鉴别方法。

背景技术

女贞子(Ligustri Lucidi Fructus)为木犀科植物女贞的干燥成熟果实，具有滋补肝肾明目乌发的功效，2002年卫生部公布女贞子可用于保健食品。从女贞子中已分离出多类生物活性天然成分(包括三萜，环烯醚萜，类黄酮，报道了苯乙醇苷等)，药理作用包括抗肿瘤，保肝，免疫调节，抗氧化，抗衰老，抗炎和降低高胆固醇血症等。在临床实践中，2015版药典中记录了女贞子的多种炮制方法，以加强药物效用，减除毒性或副作用，其中以酒制品使用最为重要。

另外，药典中收藏30个包含女贞子的复方，其中为酒女贞子的有9种。但目前关于炮制后的女贞子成分变化的研究关注的多为极少数(通常少于5个)或单一类型的化合物(如三萜类齐墩果酸和熊果酸；环烯醚萜类特女贞苷，橄榄苦苷，G13，女贞苷，木樨榄苷-11-甲酯和女贞酸；以及苯乙醇类的红景天苷，羟基酪醇，酪醇，松果菊苷等)，缺乏潜在化学基础全面系统的研究。女贞子表面为黑紫色或灰黑色，皱缩不平，酒制品由于在炮制过程中，其内含物随酒渗出附于表面而具有一层白色霜状物。

目前，对于区别女贞子黄酒炮制前后样品多用肉眼鉴别，尚未见质谱方面等灵敏度高、快速的鉴别报道。

功效和毒性的变化往往与加工过程中药材整体化学变化密切相关。受益于分析技术的快速发展，可以直接通过各种分析方法描述化学变化(例如近红外光谱，核磁共振，和环境电离质谱法等)。中药往往化学成分复杂，各组分极性、含量差异大。基于数据依赖性采集(DDA)的常规非目标性分析策略，那些低含量化合物经常面临严重干扰难以描述。因此，灵敏靶向的分析方法对于系统表征变得极为重要。

代谢组学作为一种新兴的学科，是效仿基因组学和蛋白质组学的研究思想，对生物体内所有代谢物进行定量分析，旨在寻找代谢物与生理病理变化的相对关系的研究方式。分析技术和信息学的最新研究已经将代谢组学用于药物发现和精准医学，已成为代谢物综合分析比较重要的技术手段。植物所含化合物种类多，含量范围大，目前代谢组学是中药认证和食品科学的有力工具，可确保安全性，质量和可追溯性。代谢组学分为非目标和目标模式两种，基于MS的代谢组学方法凭借高灵敏度而在代谢组学中广泛地使用。非靶向代谢组学通常通过全扫描MS或MS^E测定生物标志物发现到系统代谢组的变化，而靶向模式通过MRM定量测定已知化合物，基于有限标准化合物分析的代谢组学方法限制了LC-MS在植物研究中的应用。

发明内容

本发明提供一种女贞子生品和酒制品的鉴别方法，以实现市售的女贞子生品和酒制品的快速鉴别。具体技术方案如下：

一种女贞子生品和酒制品的鉴别方法，以10-羟基-木樨榄苷二甲酯、新女贞苷或同分异构体、8-demethyl-7-ketologanin、elenolic acid、毛蕊花糖苷、木樨草素中的一种或至少两种作为标志物；并以橄榄苦苷糖苷配基为内标。

经过验证，选取上述的每一个化合物单独作为标志物已经能够较好地分辨女贞子生品和酒制品。

作为解释和说明，本领域技术人员可以理解：在知晓上述标志物和内标的基础之上，已经可以通过本领域常规技术手段对女贞子样品进行一般的分离检测，并在此基础之上经过试验研究后加以初步判断。