[发明专利]一种重组人Betacellulin的制备方法在审
| 申请号： | 201910970819.3 | 申请日： | 2019-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN110938643A | 公开（公告）日： | 2020-03-31 |
| 发明（设计）人： | 胡育龙;李利佳;古想娣;吴都;欧晓涛;蒋鹏;李晓平;陈小锋 | 申请（专利权）人： | 东莞市东阳光生物药研发有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/62;C07K14/475 |
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| 地址： | 523871 广东省东莞市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 betacellulin 制备 方法 | ||
1.一种重组人Betacellulin的制备方法，其特征在于，构建的重组表达质粒包含编码GB1标签蛋白的核苷酸序列SEQ ID NO:1。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，构建的重组表达质粒还包含编码其他标签蛋白、蛋白酶识别位点和人Betacellulin的核苷酸序列SEQ ID NO:2。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的其他标签蛋白是His-tag标签蛋白。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的蛋白酶识别位点是肠激酶酶切位点。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包含重组蛋白的表达过程，在无动物源培养基中进行种子培养和发酵表达。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包含重组人Betacellulin的纯化过程，采用镍填料进行重组蛋白的捕获。
7.根据权利要求6所述的重组人Betacellulin的纯化过程，其特征在于，还包含标签蛋白的去除。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述的标签蛋白的去除是采用肠激酶特异性酶切重组蛋白中肠激酶位点的方式。
9.根据权利要求1-8所述的方法，其特征在于，重组人Betacellulin的纯化过程还包含采用C8反相柱的方式进行精纯。
10.权利要求1所述的GB1标签蛋白在提高重组人Betacellulin表达量中的用途。
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