[发明专利]一种香蕉枯萎病抗性相关的SCAR分子标记及其检测方法和应用有效
| 申请号： | 201910961476.4 | 申请日： | 2019-10-11 |
| 公开（公告）号： | CN110714093B | 公开（公告）日： | 2021-03-12 |
| 发明（设计）人： | 徐春香;冯国恩;李小泉;陈厚彬;吕顺;王芳 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 赵崇杨 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 香蕉 枯萎病 抗性 相关 scar 分子 标记 及其 检测 方法 应用 | ||
1.一种香蕉枯萎病抗性相关的SCAR分子标记，其特征在于，所述SCAR分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一种用于扩增权利要求1所述SCAR分子标记的引物。
3.根据权利要求3所述的引物，其特征在于，所述引物分别如SEQ ID NO:2～3所示。
4.权利要求1所述的SCAR分子标记或权利要求2～3任一项所述的引物在鉴定香蕉枯萎病抗性或筛选抗枯萎病香蕉品种或在制备香蕉枯萎病抗性检测试剂盒中的应用。
5.一种鉴定香蕉枯萎病抗性或筛选抗枯萎病香蕉品种的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1.提取待测香蕉样品基因组DNA；
S2.以步骤S1的DNA为模板，利用权利要求2或3所述引物进行PCR扩增反应；
S3.将S2的PCR扩增产物进行电泳检测，若扩增出251bp的特异性条带则表明待测香蕉样品不具有蕉枯萎病抗性，为香蕉枯萎病感病品种；反之则表明待测香蕉样品具有蕉枯萎病抗性，为香蕉枯萎病抗性品种。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤S2所述PCR扩增反应的反应体系为：50ng/μL模板DNA 1μL，10mM引物1 1μL，10mM引物2 1μL，Mg2+Free 10×Taq buffer 2.5μL，25mM MgCl2 1.5μL，2.5mM dNTP 2μL，5U/μL Taq DNA Polymerase 0.2μL，ddH2O 15.8μL，总体积25μL。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤S2所述PCR扩增反应的反应程序为：预变性94℃5min；变性94℃30s，退火60℃30s，延伸72℃45s，30个循环；终延伸72℃，10min。
8.一种用于鉴定香蕉枯萎病抗性或筛选抗枯萎病香蕉品种的试剂盒，其特征在于，含有权利要求2或3所述的引物。
9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，还含有PCR扩增反应所需试剂和香蕉样品基因组DNA提取所需试剂。
10.权利要求8或9所述的试剂盒在鉴定香蕉枯萎病抗性或筛选抗枯萎病的香蕉中的应用。
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