[发明专利]特异DNA片段com58276及其在调控植物抗逆性中的应用

说明书

本发明公开了特异DNA片段com58276及其在调控植物抗逆性中的应用。特异DNA片段com58276的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。实验证明，向野生型拟南芥Columbia‑0亚型中导入特异DNA片段com58276，得到转基因拟南芥；与野生型拟南芥Columbia‑0亚型相比，转基因拟南芥的抗旱性提高，抗旱性提高体现在丙二醛含量降低、可溶性糖含量增加、失水率降低和存活率提高。由此可见，特异DNA片段com58276可以调控植物抗逆性。本发明具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及特异DNA片段com58276及其在调控植物抗逆性中的应用。

背景技术

柠条锦鸡儿是一种主要生长在荒漠或半荒漠地区的沙地的豆科灌木，其具有高度发达的根系、极强的耐旱性和耐寒性。柠条锦鸡儿不仅是重要的牧草、工业原料，而且还可以保持水土，防止土壤沙漠化，具有重要的经济和生态价值(Fang X W，Li J H，Xiong Y C，Xu D H，Fan X W，Li F M.Responses of Caraganakorshinskii Kom.to shoot removal：mechanisms underlying regrowth[J].Ecological Research，2007，23(5)：863-871.)。

截止目前，针对柠条锦鸡儿的研究主要集中在生物学特性、生理变化以及解剖结构等方面，而抗逆相关基因、抗逆相关片段的研究甚少。CkWRKY1基因是从柠条锦鸡儿中分离的基因，其编码的CkWRKY1蛋白属于WRKY转录因子家族。研究表明，CkWRKY1蛋白为抗逆相关蛋白，在柠条锦鸡儿应对逆境胁迫中发挥重要作用(Yang Q，Yin J J，Li G，Qi L W，YangF Y，Wang R G，Li G J.Reference gene selection for qRT-PCR inCaraganakorshinskiiKom.under different stress conditions[J].Molecular BiologyReports，2014，41(4):2325-2334.)。

发明内容

本发明的目的是提高植物的抗逆性，如抗旱性。

本发明首先保护一种特异DNA分子，其核苷酸序列可如SEQ ID NO：1所示。

含有所述特异DNA分子的表达盒也属于本发明的保护范围。

所述表达盒(从5’至3’)可包括启动子区、转录起始区、目的基因区(含有所述特异DNA分子)、转录终止区和任选的翻译终止区。所述启动子区和目的基因区对宿主而言可为天然的/类似的，或者，所述启动子区和目的基因区相互之间可为天然的/类似的，或者，所述启动子区和/或目的基因区对宿主而言或者其相互之间为异源的。如本文所使用，“异源的”指序列为源自外来物种的序列，或，如果来自相同物种，则通过刻意的人为干预在组分和/或基因组位点方面对天然形式进行了实质性修饰。任选含有的转录终止区可与转录起始区同源，与可操作地连接的目的基因区同源，与植物宿主同源；或；目的基因区、宿主为外源或异源。转录终止区可来自根癌土壤杆菌的Ti-质粒，例如章鱼碱合酶和胭脂碱合酶终止区。

所述表达盒还可包括5’引导序列。5’引导序列可增强翻译。

在制备表达盒时，可应用衔接头或联结子连接特异DNA分子、或、可涉及其它操作以提供适当的限制酶切位点、去除多余的DNA、去除限制酶切位点等。为达到这一目的，可进行体外突变、引物修复、限制性酶切、退火、重新替换，例如转换和颠换。