[发明专利]体外环境中细胞捕获及检测方法在审

专利信息
申请号: 201910955910.8 申请日: 2019-10-09
公开(公告)号: CN112626172A 公开(公告)日: 2021-04-09
发明(设计)人: 许宝芝;王卿卿 申请(专利权)人: 德路通(石家庄)生物科技有限公司
主分类号: C12Q1/6806 分类号: C12Q1/6806;G01N1/40;G01N33/68;G01N33/58
代理公司: 石家庄旭昌知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 13126 代理人: 张会强
地址: 050000 河北省石家*** 国省代码: 河北;13
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摘要:
搜索关键词: 体外 环境 细胞 捕获 检测 方法
【权利要求书】:

1.一种体外环境中细胞捕获方法,其特征在于:该细胞捕获方法用于在体外环境中对体液或混合有体液的混合液体中的细胞进行捕集,且:

s1.若所述体液为血液,所述细胞捕获方法包括对血液进行抗凝处理,将具有细胞采集区的采样器的采集区浸泡于血液中进行细胞捕集,或者,血液进行红细胞裂解去除红细胞,再去除白细胞,并将具有细胞采集区的采样器的采集区浸泡于血液中进行细胞捕集;

s2.若所述体液不为血液,或者进行细胞捕集的是混合有体液的混合液体,所述细胞捕获方法包括:

步骤s21.离心所述体液并获得沉淀物;

步骤s22.向步骤s21最终获得的沉淀物中加入完全培养液,混合均匀得到沉淀悬浮液;

步骤s23.将具有细胞采集区的采样器的采集区浸泡于步骤s22的悬浮液中,并整体放置于摇床上于恒温环境下进行吸附,以由所述采集区捕集细胞。

2.根据权利要求1所述的体外环境中细胞捕获方法,其特征在于:步骤s21包括:

步骤s211.取一部分体液或混合液体室温离心;

步骤s212.离心后去除上清液,留下沉淀物;

步骤s213.再取一部分体液与步骤s212中的沉淀物混合,室温离心;

步骤s214.重复步骤s212和步骤s213,直至所有体液离心完成;

步骤s215.在步骤s214中最后一次离心后,去除上清液,留下最终获得的沉淀物。

3.根据权利要求2所述的体外环境中细胞捕获方法,其特征在于:s2中,各离心步骤与吸附步骤均在低吸附离心管中进行。

4.根据权利要求2所述的体外环境中细胞捕获方法,其特征在于:在进行步骤s23之前,还包括对步骤s22的悬浮液进行吹打混均的处理步骤。

5.根据权利要求2所述的体外环境中细胞捕获方法,其特征在于:步骤s211与步骤s213中采用水平离心机进行离心,步骤s23中整体放置于立体摇床上进行吸附。

6.根据权利要求5所述的体外环境中细胞捕获方法,其特征在于:步骤s23中每吸附设定阈值时间,将采样器翻转一次。

7.根据权利要求1至6任一项所述的体外环境中细胞捕获方法,其特征在于:s2中还包括:

步骤s24.吸附完成后,将采样器的采集区置于预冷的固定溶液的进行细胞固定。

8.一种细胞检测方法,其特征在于:该检测方法用于对权利要求1至7任一项所述的体外环境中细胞捕获方法所捕获的细胞进行检测,且所述检测方法至少包括通过对捕获的细胞进行免疫荧光染色以进行细胞蛋白的检测,以及提取捕获细胞的DNA并进行全基因组扩增,以进行包括但不限于数字PCR、荧光定量PCR和基因二代测序的基因检测。

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