[发明专利]利用PCR反应系统进行PCR反应的方法

说明书

本发明提出了利用PCR反应系统进行PCR反应的方法，该方法包括：将所述活塞进行第一移动处理；将所述活塞进行第二移动处理，以便使进入注射室的所述稀释液与裂解冻干粉和样本进行第一混合处理；将第一混合处理产物进行裂解处理；将所述活塞进行第三移动处理；将所述活塞进行第四移动处理，以便使进入注射室的所述裂解处理产物与剩余部分稀释液进行第二混合处理；将所述活塞进行第五移动处理，以便使第二混合处理产物进入所述注射室；将所述活塞进行第六移动处理，以便使进入注射室的所述第二混合处理产物与反转录酶和PCR原料冻干粉进行第三混合处理；以及将第三混合处理产物进行PCR温度循环扩增处理。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体地，本发明涉及利用PCR反应系统进行PCR反应的方法。

背景技术

传统的PCR反应过程一般都是分开进行的，即先通过核酸提取试剂盒提取所需要的核酸，然后再将提取出的核酸和试剂混合添加到PCR反应管中，最后再将PCR反应管放入PCR仪器中进行PCR扩增反应，才能得出最终结果。传统的PCR反应过程操作步骤繁琐，工作效率低。

因此，简便高效的PCR反应过程还需要进一步研究开发。

发明内容

本申请是基于发明人对以下事实和问题的发现和认识作出的：

传统的PCR反应过程操作步骤繁琐，工作效率低。究其原因，发明人发现，主要在于传统的PCR反应过程中的每一步一般都需要专业人士进行操作，并且这些操作一般都需要通过不同的仪器如核酸纯化仪、全自动工作站等分别进行，另外，整个过程的操作也需要在标准的PCR实验室环境下才能进行。基于上述问题，发明人通过微流控管路将核酸的提取、核酸和试剂的混合以及最终PCR的反应全部整合到了一个系统中，利用该系统进行PCR反应的方法实现了真正的全自动化操作，解决了传统PCR实验过程需要在专业实验环境下由专业人士进行操作的难题，减少了人为操作带来的误差，极大地提高了PCR反应的工作效率，大大节约了人力资源成本。

为此，在本发明的第一方面，本发明提出了一种利用PCR反应系统进行PCR反应的方法。根据本发明的实施例，所述PCR反应系统包括：样本容纳单元，所述样本容纳单元内设置有裂解冻干粉和样本，并且所述样本容纳单元具有第一液体出/入口；稀释液容纳单元，所述稀释液容纳单元内设置有稀释液，并且所述稀释液容纳单元具有稀释液出口；PCR反应单元，所述PCR反应单元内设置有反转录酶和PCR原料冻干粉，并且所述PCR反应单元具有PCR反应液出口和裂解后的样本混合液入口；以及活塞单元，所述活塞单元包括注射室和活塞，所述注射室具有第二液体出/入口，所述第二液体出/入口通过第一管路与所述第一液体出/入口相连，所述第二液体出/入口通过第二管路与所述稀释液出口相连，所述第二液体出/入口通过第三管路与所述裂解后的样本混合液入口相连，所述PCR反应液出口通过第四管路与所述稀释液出口相连；所述方法包括：将所述活塞进行第一移动处理，以便使部分稀释液进入所述注射室，所述稀释液设置在所述稀释液容纳单元内；将所述活塞进行第二移动处理，以便使进入注射室的所述稀释液与裂解冻干粉和样本进行第一混合处理，所述裂解冻干粉和所述样本设置在所述样本容纳单元内，所述第一混合处理是在所述样本容纳单元中进行的；将第一混合处理产物进行裂解处理，所述裂解处理是在所述样本容纳单元中进行的；将所述活塞进行第三移动处理，以便使裂解处理产物进入所述注射室；将所述活塞进行第四移动处理，以便使进入注射室的所述裂解处理产物与剩余部分稀释液进行第二混合处理，所述第二混合处理是在所述稀释液容纳单元中进行的；将所述活塞进行第五移动处理，以便使第二混合处理产物进入所述注射室；将所述活塞进行第六移动处理，以便使进入注射室的所述第二混合处理产物与反转录酶和PCR原料冻干粉进行第三混合处理，所述反转录酶和PCR原料冻干粉设置在所述PCR反应单元内，所述第三混合处理是在所述PCR反应单元中进行的；以及将第三混合处理产物进行PCR温度循环扩增处理，所述PCR温度循环扩增处理是在所述PCR反应单元中进行的。