[发明专利]缓冲液组合物

说明书

本发明提出了缓冲液组合物，该组合物包括：丙三醇，氯化盐，Tris‑HCl，表面活性剂以及水。该缓冲液组合物能够同时在样本裂解和PCR扩增反应中发挥缓冲作用，从而为样本的核酸提取和荧光PCR反应的一体化提供了技术支持。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体地，本发明涉及缓冲液组合物，更具体地，本发明涉及缓冲液。

背景技术

现有的荧光定量PCR反应一般主要分4个步骤：首先进行样本的裂解和核酸的提取，之后进行荧光定量PCR反应试剂的配制，随后将样本加入PCR反应体系中，最后再进行上机检测。在样本的裂解和核酸的提取期间需要用到样本裂解缓冲液，而在PCR反应期间需要用到PCR缓冲液。

发明内容

本申请是基于发明人对以下事实和问题的发现和认识作出的：

发明人发现，现有的样本裂解缓冲液与PCR缓冲液在配方和组分上有很大的不同，样本裂解缓冲液专用于样本裂解和样本核酸提取，而PCR缓冲液专用于PCR扩增反应，两种缓冲液不能通用。基于上述问题，发明人通过大量的实验探究，研究开发了一种缓冲液组合物，该组合物能够同时在样本裂解和PCR扩增反应中发挥缓冲作用，从而为样本的核酸提取和荧光PCR反应的一体化提供了技术支持。

为此，在本发明的第一方面，本发明提出了一种缓冲液。根据本发明的实施例，所述缓冲液包括：多元醇，氯化盐，Tris-HCl，表面活性剂以及水。在一些实施例中，所述多元醇为丙三醇。根据本发明实施例的缓冲液对样本裂解液和PCR反应体系均有一定的缓冲作用，经过所述缓冲溶液的缓冲稀释，样本裂解后的裂解液不需要纯化即可直接加入PCR反应体系中完成PCR反应，为样本的核酸提取与PCR检测一体化提供了技术支持。

根据本发明的实施例，上述缓冲液还可进一步包括如下附加技术特征至少之一：

根据本发明的实施例，所述表面活性剂包括选自吐温20(Tween20)、吐温80、聚乙二醇辛基苯基醚、十二烷基硫酸钠(SDS)、十二烷基苯磺酸钠、二辛基琥珀酸磺酸钠、甘胆酸钠的至少之一。

根据本发明的实施例，所述氯化盐包括选自氯化钾、氯化钠、氯化镁的至少之一。

根据本发明的实施例，所述氯化盐为氯化镁和氯化钠，基于所述缓冲液的总体积，所述氯化镁的浓度为0.5～15mmol/L，如为1.0、1.5、2.0、3.0、5.0、6.0、8.0、10.0或12.0mmol/L，所述氯化钠的浓度为1～150mmol/L，如为2、4、5、10、20、40、50、60、80、100或120mmol/L，所述表面活性剂的浓度为0.1～7％，如为0.1、0.2、0.4、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0或7.0％，所述丙三醇的浓度为2～20％，如为3、5、7、8、9、12、15或18％。需要说明的是，所述表面活性剂为十二烷基硫酸钠等固体类时，所述表面活性剂的浓度为质量体积浓度，指的是每100mL溶液中所述表面活性剂的质量，单位为g，例如，所述十二烷基硫酸钠的浓度为0.1～7％，指的是每100mL缓冲液中十二烷基硫酸钠的质量为0.1～7g。所述表面活性剂为聚乙二醇辛基苯基醚或吐温20等液体类时，所述表面活性剂的浓度为体积浓度，指的是每100mL溶液中所述表面活性剂的体积，单位为mL，例如，所述聚乙二醇辛基苯基醚或吐温20的浓度为0.1～7％，指的是每100mL缓冲液中聚乙二醇辛基苯基醚或吐温20的体积为0.1～7mL。另外，所述丙三醇的浓度2～20％为体积浓度，指的是每100mL缓冲液中丙三醇的体积为2～20mL。发明人发现，所述缓冲液中各成分的浓度在该范围时，所述缓冲液能够更加有效地同时在样本裂解和PCR扩增反应中发挥缓冲作用。