[发明专利]TDGF-1截短体小分子多肽在抗肝纤维化中的应用

说明书

本发明公开了一种TDGF‑1截短体小分子多肽在抗肝纤维化中的应用。本发明实验证明TDGF‑1截短体小分子多肽在肝星状细胞中具有阻断TGF‑β信号通路以及降低α‑SMA表达的能力，是抗纤维化治疗的理想的多肽类药物，又因为本发明的TDGF‑1截短体小分子多肽缺少了促肿瘤结构域导致其在抗纤维化应用中更具有安全性，具有良好的市场应用前景。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及TDGF-1截短体小分子多肽在抗肝纤维化中的应用。

背景技术

肝纤维化几乎是所有慢性肝脏疾病向终末期进展共有的病理性改变，其实质就是肝脏炎症坏死后的纤维组织瘢痕。导致肝纤维化形成的慢性肝脏疾病包括酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，以及由病毒感染引发的慢性肝炎等。若病情持续进展，肝纤维化会发展成为肝硬化、肝癌。因而，对肝纤维化患者进行适时、积极的干预，对于降低终末期肝病的发生几率非常重要。

肝纤维化的本质是一种疤痕反应，各种肝损伤都可以造成疤痕反应，包括中毒，代谢以及病毒侵袭。构成该反应的基础则是肝中实质细胞的活化，实质细胞(主要是HSC)转化为有弹性的MF，进而产生疤痕包围受损区域。Disse腔是肝血窦内皮与肝细胞之间的部分，居于此间的HSC是一种实质细胞。静态的HSC(qHSC)富含维生素A，一旦出现肝受损，HSC就会活化，失去维生素A，进而扩大增殖，富有弹性，释放促炎症，促纤维化以及促分裂细胞因子。活化后的HSC能够转移，造成ECM组分的沉积。

对于肝纤维化的发生机制，目前研究最为清楚的就是肝星状细胞(HSC)在相关炎症因子的作用下发生活化、细胞外基质(ECM)的过度沉积。因此，活化的肝星状细胞(hepatic stellate cell，HSC)是肝脏纤维化发生时ECM的主要来源，是肝纤维化药物干预的最重要的靶标。在细胞因子中，与肝星状细胞激活关系最为密切的是转化生长因子β(TGF-β)。TGF-β在正常人肝脏中主要由肝窦状内皮细胞、肝脏巨噬细胞、淋巴细胞表达，而HSC本身表达量较低，其信号通路能够抑制肝实质细胞的再生效率，并促进HSC的活化。TGF-β与细胞膜表面的TGF-βⅡ型受体结合并引起受体变构，进一步招募I型受体，形成TGF-β/receptorII/receptorI三体复合物，并进一步磷酸化其下游的细胞质转导因子，包括经典通路的Smads，被激活的Smads复合物向细胞核内进行转移并调控基因表达。胶原蛋白CollagenI是Smads调控的靶标基因，TGF-β在促进ECM合成和分泌的同时又抑制了ECM的降解。随着胶原的增多，使得TGF-β形成了一个自分泌的反馈通路，使得胶原蛋白及PDGF进一步积累。另外，TGF-β促进HSC激活和增殖的同时，又抑制了肝实质细胞的再生，导致肝脏发生纤维化。

畸胎瘤演化生长因子TDGF-1，是1987年从人畸胎瘤cDNA文库中钓取的基因，是EGF-CFC家族成员之一，为人类胚胎早期发育所必须的分子。TDGF-1蛋白分子结构相对简单，除了N端信号肽序列和C端的COOH疏水氨基酸序列之外，仅包含两个大的功能结构域，EGF结构域和CFC结构域。近年来，TDGF-1的CFC结构域逐渐被认为是TDGF-1行使其促肿瘤发生和干细胞逆向分化功能的主要分子区域。TDGF-1结合肿瘤细胞表面的Glypican-1受体，进一步活化MAPK和AKT通路，而这二者是引起肿瘤细胞快速增殖和转移的经典通路；另外，TDGF-1依赖CFC结构域结合肿瘤细胞表面的Wnt受体，辅助性激活Wnt/β-catenin通路，并起到稳定β-catenin结构的作用。Bianco等人认为，Wnt/β-catenin通路的持续性激活对于维持肿瘤干细胞特性非常重要。因而，作为一种癌胚抗原，CFC结构域的功能发挥了主要作用，而EGF结构域的氨基酸序列由于相对于EGF分子有较明确的突变序列，引发其功能限制。

现有技术还未见TDGF-1蛋白及其蛋白结构域与肝纤维化存在相关性的报道。

发明内容