[发明专利]一种透明质酸寡糖修饰的矿化胶原仿生骨修复材料

权利要求书

1.一种透明质酸寡糖修饰的矿化胶原仿生骨修复材料，结构如下：

胶原-羟基磷灰石复合材料中的胶原通过C-N键连接透明质酸寡糖，获得糖基化修饰的矿化胶原复合材料，透明质酸寡糖的分子量为776～5000 Da；

透明质酸寡糖修饰的胶原分子自组装形成胶原微纤维；糖基化胶原分子调控钙磷盐沿微纤维轴向取向排列，进一步组装形成矿化胶原纤维；矿化胶原纤维进一步组装形成取向排列的糖基化矿化胶原纤维束；通过静电纺丝，将上述矿化材料组装成纳米纤维仿生骨修复材料。

2.如权利要求1所述的矿化胶原仿生骨修复材料，其特征在于，所述透明质酸寡糖修饰胶原的载糖质量百分比为0.909%～5.266%。

3.如权利要求1所述的矿化胶原仿生骨修复材料，其特征在于，所述胶原为I型胶原，胶原分子量为8～12KD。

4.如权利要求1所述的矿化胶原仿生骨修复材料，其特征在于，按照如下步骤制备得到：

（1）将胶原、透明质酸和NaBH₃CN加入反应体系中，36～38℃避光条件下搅拌反应1～3天，然后加入醋酸溶液稀释，超滤离心，沉淀干燥后，制得糖基化胶原蛋白；

所述反应体系为六氟异丙醇（HFP）或二甲基酰胺（DMF）溶剂之一与碳酸氢钠的混合溶液，碳酸氢钠的摩尔浓度为0.05～0.15M，六氟异丙醇或二甲基酰胺与碳酸氢钠的体积比为3:(1～3)；

所述胶原加入反应体系后的质量浓度为18～22 g/L，透明质酸加入反应体系后的质量浓度为4～6 g/L，NaBH₃CN加入反应体系后的质量浓度为6g/L～18g/L；

（2）将步骤（1）制得的糖基化胶原蛋白加入盐酸中，搅拌溶解，制得浓度为0.5～0.7mg/ml的糖基化胶原蛋白溶液，然后加入CaCl₂溶液，混合均匀，静置8～15min，然后搅拌加入NaH₂PO₄溶液，调节pH至7，25～38℃静置2～24h，固液分离，沉淀经洗涤后，干燥，制得糖基化胶原矿化复合材料；

所述CaCl₂溶液的添加量为步骤（1）中每克胶原添加0.023～0.0913 mol的CaCl₂；CaCl₂与NaH₂PO₄的摩尔比为（1.5～1.8）：1；

（3）将成型剂溶解于六氟异丙醇中，制得质量浓度为2～4%的溶液，然后加入步骤（2）制得的糖基化胶原矿化复合材料，糖基化胶原矿化复合材料与成型剂的质量比为（1～3）：1，混合均匀得电纺液，静电纺丝，制得透明质酸寡糖修饰的矿化胶原仿生骨修复材料；

所述成型剂为胶原、聚乳酸或步骤（1）制得的糖基化胶原蛋白。

5.如权利要求4所述的矿化胶原仿生骨修复材料，其特征在于，满足以下条件之一项或多项：

i.所述步骤（1）中，碳酸氢钠的摩尔浓度为0.1 M，六氟异丙醇或二甲基酰胺溶剂与碳酸氢钠的体积比为3:2；所述胶原为I型胶原，加入反应体系后的质量浓度为20 g/L，透明质酸加入反应体系后的质量浓度为5 g/L，NaBH₃CN加入反应体系后的质量浓度为6g/L；

ii.所述步骤（1）中，37℃避光条件下搅拌反应1天；

iii.所述步骤（1）中，醋酸溶液的质量浓度为5%，稀释体积倍数为8倍；

iv.所述步骤（1）中，超滤离心的超滤管为30k，离心条件为：4000 g/min，25 min/次，超滤次数为3～8次；

v.所述步骤（1）中，干燥为真空冷冻干燥。

6.如权利要求4所述的矿化胶原仿生骨修复材料，其特征在于，所述步骤（2）中，盐酸的浓度为0.01 M。

7.如权利要求4所述的矿化胶原仿生骨修复材料，其特征在于，所述步骤（2）中，糖基化胶原蛋白溶液的浓度为0.6mg/ml。