[发明专利]一种具有防治十字花科根肿病功能的芽孢杆菌及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种具有防治十字花科根肿病功能的芽孢杆菌及其制备方法和应用，所述的芽孢杆菌菌株为甲基营养型芽孢杆菌(WSWFJ‑29，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号：CGMCC No.18269。所述的甲基营养型芽孢杆菌WSWFJ‑29的菌剂，是以所述的甲基营养型芽孢杆菌WSWFJ‑29经菌种活化、菌种纯化、种子液制备、发酵得到的菌剂。所述的甲基营养型芽孢杆菌WSWFJ‑29的菌剂的制备方法，包括菌种活化、菌种纯化、种子液制备、发酵步骤。所述甲基营养型芽孢杆菌WSWFJ‑29为活性成分的制剂对微生物细菌和十字花科根肿病均具有显著的防治作用。

技术领域

本发明属于微生物分离培养技术领域，具体涉及一种具有防治十字花科根肿病功能的芽孢杆菌及其制备方法和应用。

背景技术

十字花科根肿病是一种对蔬菜产量危害严重的病害，是目前十字花科蔬菜中流行的一种土传病害。此病在我国发生分布较广，尤其在我国的云南省(40余个县)、四川省等南方省份蔬菜种植地发病较重，专门危害十字花科的白菜、青菜、芥菜、薹菜、萝卜、甘蓝、花菜等。十字花科蔬菜感病后，导致根和茎吸收传导养分受阻，生长不良、萎蔫、矮化，产量和品质受损，以致减产，严重的导致绝产，造成严重的经济损失。目前十字花科根肿病的发病面积正在逐步加大，由于常规药剂对十字花科根肿病防治效果不理想，防治比较困难，在云南省通海等蔬菜主产区甚至被菜农称为蔬菜病害上的癌症，成了十字花科蔬菜的第一大病害，严重地制约了当地的蔬菜生产与发展。

十字花科根肿病的防治重在苗期预防，由于化学药剂和物理防控对于病害的防治效果较差，基于生物产业的快速发展，采用农用微生物菌剂进行根肿病的防控，既能避免作物产生抗药性，又能实现绿色环保无残留，所以，研制一株高效防治根肿病的功能菌株及其制成的防控产品对于蔬菜产业的健康持续发展尤为重要。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种高效、无毒、安全、无残留，对环境友好，使用简便的防治十字花科根肿病病害的甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)WSWFJ-29的菌剂；第二目的在于提供所述的甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)WSWFJ-29的菌剂的制备方法。

本发明的第一目的是这样实现的，所述的防治十字花科根肿病病害的芽孢杆菌菌株为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)WSWFJ-29，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，保藏日：2019年07月22日，保藏编号：CGMCCNo.18269，所述甲基营养型芽孢杆菌属于真细菌界，后壁菌门，杆菌纲，芽孢杆菌目、芽孢杆菌科，芽孢杆菌属。

本发明所述的甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)WSWFJ-29，分离自云南嵩明蔬菜种植基地，经形态学、培养性状、常规生理生化和Biolog全自动鉴定系统测定，该菌株为甲基营养型芽孢杆菌的一个新菌株(Bacillus methylotrophicus)WSWFJ-29。该菌株具有以下特征：

1)在PDA培养基上菌落乳白色圆形，表面湿润，菌落表面呈火山口状，边缘光滑，无隔膜，半透明，较为浓稠。

2)该菌株定殖能力强，抑菌能力强，具有杀菌、防病和增产作用，该菌还能在十字花科根际土中定殖。

本发明的第一目的是这样实现的，是以所述的甲基营养型芽孢杆菌菌株(Bacillus methylotrophicus)WSWFJ-29经菌种活化、菌种纯化、种子液制备、发酵制备得到。

本发明的第二目的是这样实现的，包括菌种活化、菌种纯化、种子液制备、发酵步骤，具体包括：