[发明专利]一种oppA基因改造的产L-色氨酸重组菌株及其构建方法与应用有效
| 申请号: | 201910927604.3 | 申请日: | 2019-09-27 |
| 公开(公告)号: | CN110846327B | 公开(公告)日: | 2022-08-26 |
| 发明(设计)人: | 赵春光;孟刚;魏爱英;贾慧萍;苏厚波;杨立鹏;郭小炜;田斌 | 申请(专利权)人: | 宁夏伊品生物科技股份有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/52 | 分类号: | C12N15/52;C12N9/00;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/22;C12R1/19 |
| 代理公司: | 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) 11535 | 代理人: | 田芳 |
| 地址: | 750100 宁夏*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 oppa 基因 改造 色氨酸 重组 菌株 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种提高L-色氨酸发酵量或者生产L-色氨酸的方法,其特征在于,利用野生型oppA基因编码序列第817位碱基发生突变而形成的核苷酸序列,所述野生型oppA基因编码序列如SEQ ID NO:1所示,突变为SEQ ID NO:1中第817位碱基由腺嘧啶(A)突变为鸟嘌呤(G);所述突变后的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.根据权利要求1所述的方法,将所述突变后的核苷酸序列导入质粒构建重组载体。
3.根据权利要求2所述的方法,将所述重组载体导入宿主菌株构建重组菌株。
4.根据权利要求3所述的方法,所述重组菌株的构建方法包括如下步骤:
(1)改造如SEQ ID NO:1所示的野生型oppA基因开放阅读框区域的核苷酸序列,使其第817碱基发生突变,得到突变的oppA基因开放阅读框区域多核苷酸序列;
(2)将所述突变的多核酸序列与质粒连接,构建重组载体;
(3)将所述重组载体导入宿主菌株,得到所述包含突变oppA编码基因的重组菌株。
5.根据权利要求4所述的方法,包括采用所述重组菌株进行发酵,制备得到L-色氨酸。
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