[发明专利]一种快速检测孕妇可溶性血管内皮生长因子受体-1的免疫层析检测卡及其制备方法

说明书

本发明涉及一种快速检测孕妇可溶性血管内皮生长因子受体‑1的免疫层析检测卡，包括试纸条，包括试纸条，所述试纸条包括检测线及质控线，所述检测线上包被有一株鼠抗人sFlt‑1单克隆抗体，所述质控线上包被有羊抗兔多克隆抗体。本发明所提供的快速检测孕妇可溶性血管内皮生长因子受体‑1的免疫层析检测卡，其可用于血清、血浆和全血的检测，以用于预测子痫前期相关疾病的诊断。

技术领域

本发明属于体外诊断领域，涉及一种快速检测孕妇可溶性血管内皮生长因子受体-1的免疫层析检测卡及其制备方法。

背景技术

VEGFR是受体酪氨酸激酶(RTK)家族成员，含有细胞外配体结合区，具有七个免疫球蛋白(Ig)样结构域，跨膜区段和细胞质结构域内的酪氨酸激酶(TK)结构域。该受体与VEGFR-A，VEGFR-B和PLGF结合，在血管生成和血管发生中起重要作用。在血管内皮细胞，胎盘滋养层细胞和外周血单核细胞中发现该受体的表达。内皮细胞表达三种不同的血管内皮生长因子(VEGF)受体，它们被命名为VEGFR-1(Flt-1)，VEGFR-2(KDR/Flk-1)，VEGFR-3(Flt-4)。已经发现了编码该基因的不同同种型的多种转录物变体。包括全长跨膜受体同种型和缩短的可溶性同种型。

Flt-1胞外域剪接后形成可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)，sFlt-1保留了与PLGF、VEGF结合的高亲和力特性，能使PLGF、VEGF的酪氨酸激酶活性丧失，因此认为，sFlt-1是PLGF、VEGF的拮抗剂。sFlt-1与先兆子痫的发作有关。sFlt-1在子痫前期的发病过程中其重要作用，其高表达可降低PLGF、VEGF的表达水平，导致血管生成障碍、内皮细胞损伤，进而影响血管壁的完整性和通透性，出现蛋白尿、水肿和血液浓缩等。体内和体外实验均证实，胎盘组织缺氧后sFlt-1表达水平上升。

发明内容

有鉴于此，本发明的主要目的在于提供一种快速检测孕妇可溶性血管内皮生长因子受体-1的免疫层析检测卡及其制备方法。

为了实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

一种快速检测孕妇可溶性血管内皮生长因子受体-1的免疫层析检测卡，包括试纸条，所述试纸条包括检测线及质控线，所述检测线上包被有一株鼠抗人sFlt-1单克隆抗体，所述质控线上包被有羊抗兔多克隆抗体。

在本发明的一个具体方案中，其中所述试纸条还包括PVC板，所述PVC板上固定有依次连接的样品垫、标记物垫、包被垫及吸水垫，所述包被垫上依次设有检测线及质控线，所述样品垫和标记物垫连接为一体。

在本发明的一个具体方案中，其中所述包被垫靠近检测线的一端连接有标记物垫，靠近质控线的一端连接有吸水垫。

在本发明的一个具体方案中，其中所述标记物垫上包被有另一株鼠抗人sFlt-1单克隆抗体标记的表面活化的荧光乳胶微球和兔IgG标记的表面活化的荧光乳胶微球，所述另一株鼠抗人sFlt-1单克隆抗体标记的表面活化的荧光乳胶微球和兔IgG标记的表面活化的荧光乳胶微球的摩尔比为1:(0.2～4)。

在本发明的一个具体方案中，其中所述快速检测孕妇可溶性血管内皮生长因子受体-1的免疫层析检测卡还包括用于卡设试纸条的卡壳。

在本发明的一个具体方案中，其中所述卡壳包括：

底槽，其连接于所述PVC板；

上盖，其连接于所述底槽，所述上盖上设置有用于向所述样品垫上加样的加样孔；

观察窗，其设置于上盖上并用于检测线和质控线的数据采集。

一种快速检测孕妇可溶性血管内皮生长因子受体-1的免疫层析检测卡的制备方法，包括以下步骤：

1)包被垫的制备：将一株鼠抗人sFlt-1单克隆抗体和羊抗兔多克隆抗体分别包被到硝酸纤维素膜上，干燥备用；