[发明专利]sucC基因敲除的红色糖多孢菌的优化发酵方法在审
| 申请号: | 201910909507.1 | 申请日: | 2019-09-25 |
| 公开(公告)号: | CN112553132A | 公开(公告)日: | 2021-03-26 |
| 发明(设计)人: | 黄明志;原玉洁;徐峰;陈冲冲;储炬;庄英萍 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
| 主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12P19/62;C12R1/645 |
| 代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈静 |
| 地址: | 200237 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | succ 基因 红色 糖多孢菌 优化 发酵 方法 | ||
1.一种减少sucC基因敲除的红色糖多孢菌自溶的方法,其特征在于,包括:培养sucC基因敲除的红色糖多孢菌,在发酵过程中控制pH值为7±0.3;同时,在发酵起始后第50~70小时,流加硫酸铵。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的sucC基因敲除的红色糖多孢菌为以S.erythraea E3菌株为出发菌株,敲除琥珀酰辅酶A合成基因sucC。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在发酵过程中控制pH值为7±0.2;同时,在发酵起始后第55~65小时,流加硫酸铵。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,流加硫酸铵的量为0.002~0.05g/L·h;较佳地0.005~0.02g/L·h。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,发酵培养基为合成型培养基,包括葡萄糖,硫酸镁,磷酸二氢钾,磷酸氢二钾,丙氨酸,精氨酸,半胱氨酸,丝氨酸,柠檬酸三钠,氯化钴,硼酸钠,三氯化铁,氯化铜,钼酸铵。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,发酵培养基包括:葡萄糖22.0g/L、硫酸镁1.0g/L、磷酸二氢钾0.64g/L、磷酸氢二钾1.28g/L、丙氨酸0.86g/L、精氨酸0.68g/L、半胱氨酸0.78g/L、丝氨酸0.73g/L、柠檬酸三钠2.28g/L、氯化钴0.009g/L、硼酸钠0.006g/L、三氯化铁0.0068g/L、氯化铜0.00027g/L、钼酸铵0.00027g/L;其中各个组分浓度在30%范围内上下浮动,较佳地在20%范围内上下浮动,更佳地在10%范围内上下浮动。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,发酵过程中,溶氧水平大于30%,搅拌转速为250±100rpm,通气量1±0.3vvm。
8.一种提高sucC基因敲除的红色糖多孢菌的红霉素A产量的方法,其特征在于,包括:
(1)培养sucC基因敲除的红色糖多孢菌,在发酵过程中控制pH值为7±0.3;同时,在发酵起始后第50~70小时,流加硫酸铵;
(2)分离红霉素,其中红霉素A占比高于97%,更佳地高于98%,更佳地高于99%。
9.如权利要求7所述的方法,其特征在于,所述的提高红霉素产量包括:提高红霉素产物中红霉素A的占比量。
10.如权利要求7所述的方法,其特征在于,流加硫酸铵的量为0.002~0.05g/L·h;较佳地0.005~0.02g/L·h;或
发酵培养基为合成型培养基,包括葡萄糖,硫酸镁,磷酸二氢钾,磷酸氢二钾,丙氨酸,精氨酸,半胱氨酸,丝氨酸,柠檬酸三钠,氯化钴,硼酸钠,三氯化铁,氯化铜,钼酸铵。
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