[发明专利]TGR-1中TGR-1-对应异构体的检测方法

说明书

本发明提供一种采用高效液相分离的方式检测替格瑞洛中间体中异构体的新方法1.TGR‑1‑对应异构体检测方法，其特征在于：异构体对照品溶液柱前衍生后，采用高效液相分离的方式分析检测，该方法稳定性好、重现性好、操作简单，可准确的检测出异构体，有利于药品的质量控制。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，涉及一种血小板抑制剂的药物替格瑞洛关键起始物料TGR-1中TGR-1-对应异构体的检测方法。

背景技术

替格瑞洛是一种口服的血小板抑制剂药物，其关键起始物料TGR-1合成路线如下：

其中TGR-1：2-[[(3aR,4S,6R,6aS)-6-氨基四氢-2,2-二甲基-4H-环戊并-1,3-二恶茂-4-基]氧基]-乙醇；

TGR-1-对应异构体：2-[[(3aS,4R,6S,6aR)-6-氨基四氢-2,2-二甲基-4H-环戊并-1,3-二恶茂-4-基]氧基]-乙醇。

TGR-1和TGR-1-对映异构体结构式如下：

TGR-1的对应异构体是在反应中的副产物，其含量低，无紫外吸收，同时与TGR-1结构相近，保留时间相近，色谱行为相似，在色谱柱中难以分离，特别是常规HPLC法(紫外吸收)难以检测，在实际检测造成很大障碍。为有效控制产品质量，需严格控制其杂质含量，我们摸索出一套适合TGR-1中TGR-1-对应异构体检测的分析方法。该方法快速简便，稳定性及专属性良好；一定浓度范围内，浓度与峰面积之间线性关系良好；回收率试验RSD小于10.0％；最低检出量(S/N＝3)为0.003μg/ml(0.013％)；在色谱柱柱温、流速、流动相比例、不同仪器或色谱柱时，检测结果均一致，方法耐用性较好。

发明内容

本发明的目的在于提供一种TGR-1中TGR-1-对应异构体的检测方法，且方法稳定性好、重现性好，用于TGR-1-对应异构体检测。

本发明解决上述技术问题所采取的技术方案是：将TGR-1和TGR-1-对应异构体进行柱前衍生处理后，采用高效液相分离的方式分析检测，具体如下：

1)衍生化处理

取TGR-1溶液、邻苯二甲醛试液按1：1摩尔比混匀，室温放置5分钟后，作为TGR-1衍生化物溶液。

取TGR-1对应异构体溶液、邻苯二甲醛试液按1：1摩尔比混匀，室温放置5分钟后，作为TGR-1对应异构体衍生化物溶液。

反应机理：由含羰基的醛化合物(邻苯二甲醛)与一级胺类化合物(TGR-1)进行1:1亲核加成反应，亲核试剂为胺类化合物，其化合物结构中带有孤电子对的氮原子进攻羰基基团上带有正电荷的碳原子，完成亲核加成反应，形成中间物α-羟基胺类化合物，然后进一步脱水形成席夫碱。

TGR-1与邻苯二甲醛反应式如下：

TGR-1本身无紫外吸收，采用高效液相分离不能有效检测；当TGR-1-对应异构体与衍生试剂反应后，生成席夫碱，紫外吸收较强，并且TGR-1-对应异构体和TGR-1衍生后还是对应异构体，所以可采用高效液相分离进行检测。

衍生试剂：邻苯二甲醛试液，0.8mg/ml；

溶剂：甲醇；

TGR-1溶液：取TGR-1约10mg，精密称定，置10ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，作为TGR-1溶液；