[发明专利]一种苯骈吡喃酮类化合物的制备方法

说明书

本发明涉及微生物农药技术领域，具体的说是一种从菌株Acremonium sp.Z13（保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期：2019年8月2日，保藏号：CGMCC No.18117）固体发酵产物中得到苯骈吡喃酮类化合物及其分离纯化方法和应用。苯骈吡喃酮类化合物为式（一）所示。式（一）所示化合物对灰霉病菌（Botrytis cinerea）最小抑菌浓度为128μg/mL；在20μg/mL浓度时，式（一）所示化合物对马唐[Digitaria sanguinalis]胚芽鞘的生长抑制率为58.57%，与商品化除草剂乙草胺接近；本发明所得化合物可作为具有除草活性或杀菌活性的先导化合物，进而开发微生物源除草或杀菌剂。

技术领域

本发明涉及微生物农药技术领域，具体的说是一种从菌株Acremonium sp. Z13固体发酵产物中得到苯骈吡喃酮类化合物及其分离纯化方法。

背景技术

灰霉病是温室种植番茄、草莓、葡萄、蔬菜、观赏植物等最重要的植物病害之一，仅次于稻瘟病，可造成显著减产和重大经济损失。灰霉病作为一种全球性真菌病害，主要由灰葡萄孢（Botrytis cinerea）引起。灰葡萄孢具有寄主范围广、繁殖和遗传变异速度快及反复侵染频繁等特点，很容易产生抗药性，属于少数几个具有高抗药性风险的病原菌之一。

水稻田杂草发生及危害越来越重，其中马唐[Digitaria sanguinalis]的发生和危害表现近年来日益突出，已成为制约水稻丰产的主要因素之一。化学合成除草剂虽然能够有效防治杂草，但是抗药性和农药残留超标问题日趋严重，已危及农产品安全及人类健康。

从微生物、植物等生物资源中寻找杀菌或除草活性成分，具有毒性低、环境兼容性好及不易产生抗药性等优点，已经成为开发“环境友好”杀菌剂或除草剂的重要来源。

根据文献调研，苯骈吡喃酮类化合物具有显著的抗凝结、抗癌及抗艾滋病毒等活性，而本发明涉及的为新化合物苯骈吡喃酮类化合物的制备方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种苯骈吡喃酮类化合物的制备方法。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案为：

一种苯骈吡喃酮类化合物，为式（一）所示化合物，化合物分子式为C₁₂H₁₂O₃,

。

一种苯骈吡喃酮类化合物制备方法：

1）将菌株Acremonium sp. Z13（保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏日期：2019年8月2日，保藏号：CGMCC No. 18117）于固体培养基中静置发酵，发酵产物经乙酸乙酯反复浸泡提取，合并提取液进行浓缩，获得发酵粗提物；

2）将上述发酵粗提物进行硅胶柱层析，以梯度为60:1至1:1（v/v，下同）的石油醚-乙酸乙酯作为溶剂进行梯度洗脱；

3）将上述步骤2）中石油醚-乙酸乙酯=1:1洗脱组分，进行反相硅胶柱层析，以梯度为1:9至1:0的甲醇-水作为溶剂进行梯度洗脱；

4）将上述步骤3）中甲醇-水=5:5洗脱组分，进行半制备高效液相色谱法纯化，流动相为70%甲醇-水，检测波长为230 nm，流速为3 mL/min，收集保留时间t_R值为15.38 min的组分，即得式（一）所示化合物。