[发明专利]一种生菜离体培养高频再生的方法

权利要求书

1.一种生菜离体培养高频再生的方法，其特征在于，将生菜无菌苗的子叶和下胚轴离体培养并在出芽培养基上诱导成芽，再将芽转接到生根培养基上大量成苗；

所述出芽培养基的主要成分为：MS基本培养基+0.2mg/L NAA+0.5mg/L 6-BA+30g/L蔗糖+8g/L琼脂；

所述生根培养基的主要成分为：MS基本培养基+0.1mg/L IAA+30g/L蔗糖+8g/L琼脂。

2.根据权利要求1所述的一种生菜离体培养高频再生的方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)无菌接种：将种子转入消毒瓶中，以含量为1～2％的次氯酸钠为表面消毒剂，上下振荡10～15min，倒掉消毒液以无菌水冲洗2～3遍种子，每遍5～8min；沥干水分后接种于MS培养基上；

(2)愈伤组织诱导出芽：无菌苗生长5～7d后，将外植体放置于出芽培养基中诱导愈伤组织及芽分化；

(3)转接生根：待不定芽形成并伸长达1～2cm，从外植体上剥离脱分化再生成的每个不定芽转移到生根培养基。

3.根据权利要求2所述的一种生菜离体培养高频再生的方法，其特征在于，步骤(1)前，对种子进行如下处理：将干燥的生菜种子以30～40℃的温水浸泡3～4h，直至种子充分吸胀。

4.根据权利要求1或2所述的一种生菜离体培养高频再生的方法，其特征在于，所述诱导出芽培养基的配置方法为：在MS基本培养基中添加含量为0.2mg/L的激素NAA和0.5mg/L的激素6-BA，经高压灭菌后分装至培养皿中。

5.根据权利要求1或2所述的一种生菜离体培养高频再生的方法，其特征在于，所述生根培养基的配置方法为：在MS基本培养基中添加含量为0.1mg/L的激素IAA，经高压灭菌后分装至培养瓶中。

6.根据权利要求2所述的一种生菜离体培养高频再生的方法，其特征在于，所述外植体为无菌苗的子叶5～8mm切段和下胚轴3～6mm切段。

7.根据权利要求1所述的一种生菜离体培养高频再生的方法，其特征在于，培育周期比现有再生体系时间缩短7～10d。