[发明专利]植物基因组DNA的提取方法、测序方法及试剂盒

权利要求书

1.一种植物基因组DNA的提取方法，其特征在于，包括：

对植物样本进行研磨，将所得研磨粉末与细胞核提取液混合，过滤，对所得滤液进行离心，获得含有细胞核的沉淀；

利用细胞核分离液对将所述含有细胞核的沉淀进行密度梯度离心，以便获得含有细胞核的分离液；

去除所述含有细胞核的分离液中的蛋白质和RNA，获得含有DNA的溶液；

将所述含有DNA的溶液进行透析处理，以便获得所述植物基因组DNA。

2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述细胞核提取液为NIBMT溶液。

3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述过滤包括采用滤膜进行至少两次过滤处理，其中第二过滤处理的滤膜孔径小于第一过滤处理的滤膜孔径；

任选地，所述过滤包括：利用70微米孔径的滤膜进行第一过滤处理，以便获得第一过滤液；利用40微米孔径的滤膜进行第二过滤处理，以便获得第二过滤液。

4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述细胞核分离液为Percoll分离液。

5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述密度梯度离心至少包括：

采用体积分数75％的Percoll分离液和体积分数70％的Percoll分离液进行密度梯度离心。

6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，利用蛋白酶和RNA酶对所述含有细胞核的分离液进行消化处理，以便去除所述含有细胞核的分离液中的蛋白质和RNA；

任选地，所述蛋白酶为蛋白酶K溶液，所述蛋白酶K溶液含有蛋白酶K，EDTA和SDS。

7.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，利用半透膜进行所述透析处理，所述半透膜的孔径大小为0.1微米；

任选地，所述透析处理的时间为16～48小时。

8.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述植物基因组DNA大于50Kb。

9.一种植物基因组DNA提取试剂盒，其特征在于，包括：

NIBMT溶液；

Percoll分离液；

蛋白酶K溶液；

RNA酶；

半透膜；

任选地，所述试剂盒根据权利要求1～8中任一项所述的提取方法提取植物基因组DNA。

10.一种对植物基因组DNA进行测序的方法，其特征在于，包括：

利用权利要求1～8中任一项所述的提取方法提取植物样本的基因组DNA；

对所述植物基因组DNA进行文库构建，对获得的文库进行高通量测序，以便获得测序结果；

任选地，采用10X Genomics平台进行所述高通量测序。