[发明专利]一种检测牛副流感病毒3型的免疫荧光试剂及其检测试剂盒

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测牛副流感病毒3型的免疫荧光试剂及其检测试剂盒，所述的免疫荧光试剂是用荧光染料标记的抗牛副流感病毒3型的单克隆抗体；所述的单克隆抗体，是利用牛副流感病毒3型浓缩纯化的病毒粒子作为抗原，采用杂交瘤细胞单克隆抗体技术制备获得。所述的荧光染料为异硫氰酸荧光素(FITC)。所述的单克隆抗体的亚型为IgG2。检测牛副流感病毒3型的免疫荧光试剂盒中的免疫试剂为检测牛副流感病毒3型的免疫荧光试剂。本发明具有敏感性高特异性强、稳定性好、诊断速度快等优点。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测牛副流感病毒3型的免疫荧光试剂及其检测试剂盒，适用于牛副流感病毒3型的诊断及组织、血清或细胞中副流感病毒3型的检测与鉴定。

背景技术

牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)属于单分子负链RNA病毒目副黏病毒科呼吸道病毒属中的成员。牛副流感病毒3型感染牛多表现出精神沉郁、食欲不振、流涕、流泪、咳嗽、发热和呼吸困难等临床症状，同时引起机体的免疫抑制，继而继发感染其他细菌、病毒和支原体，导致牛呼吸道疾病综合征，给养牛业造成极大的危害。1959年美国研究人员从牛体中首次分离到牛副流感病毒3型，目前广泛流行于世界各国。国内的刘鹏等人在2008年从牛的鼻拭子中首次分离出牛副流感病毒3型。

对于牛副流感病毒3型的检测，多为血清学检测方法，包括病毒中和试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验等，这些方法存在着灵敏度不高，检验耗时较长的缺点；PCR作为一种分子生物学检测方法均有检测灵敏、简单的特点，但存在特异性不强、假阳性率较高不足。为此，开展牛副流感病毒3型检测方法的研究，提供一种灵敏、特异性强的牛副流感病毒3型抗原检测手段，对今后疫病的防控和消灭都具有重大意义。

发明内容

为解决现有技术中存在的问题，本发明提供了一种检测牛副流感病毒3型的免疫荧光试剂及其检测试剂盒，具体的技术方案如下所述：

一种检测牛副流感病毒3型的免疫荧光试剂，所述的免疫荧光试剂是用荧光染料标记的抗牛副流感病毒3型的单克隆抗体；所述的单克隆抗体，是利用牛副流感病毒3型浓缩纯化的病毒粒子作为抗原，采用杂交瘤细胞单克隆抗体技术制备获得。

所述的荧光染料为异硫氰酸荧光素(FITC)。

所述的单克隆抗体的亚型为IgG2。

单克隆抗体结合蛋白鉴定杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体可与牛副流感病毒3型的重组蛋白N蛋白发生特异性反应，N蛋白氨基酸序列为AGGAVIPGQKNTVSIFALGPSITDDNDKMTLALLFLSHSLDNEKQHAQRAGFLVSLLSMAYANPELYLTSNGSNADVKYVIYMIEKDPGRQKYGGLVVKTREMVYEKTTDWMFGSDLEYDQDNMLQNGRSTSTIEDLVHTFGYPSCLGALIIQVWIILVKAITSISGLRKGFFTRLEAFRQDGTVKSSLVLSGDAVEQIGSIMRSQQSLVTLMVETLITMNTGRNDLTTIEKNIQIVGNYIRDAGLASFFNTIRYGIETRMAALTLSTLRPDINRLKALIELYLSKGPRAPFICILRDPVHGEFAPGNYPALWSYAMGVAVVQNKAMQQYVTGRSYLDIEMFQLGQAVARDAESQMSSILEDELGVTQEAKQSLKKHMKNISSSDTTFHKPTGGSAIEMAIDEEAEQPESRGDQDQGNEPQSSIV。

一种检测牛副流感病毒3型的免疫荧光试剂盒，所用的免疫试剂为所述的检测牛副流感病毒3型的免疫荧光试剂。