[发明专利]一种软骨素奇数寡糖单体及其制备方法和应用有效
| 申请号: | 201910890260.3 | 申请日: | 2019-09-19 |
| 公开(公告)号: | CN110698522B | 公开(公告)日: | 2021-06-08 |
| 发明(设计)人: | 于广利;赵小亮;蔡超;郝杰杰;李国云;蒋昊 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
| 主分类号: | C07H13/04 | 分类号: | C07H13/04;C07H1/00;C08B37/00;G01N30/06;G01N30/38;A23L33/125 |
| 代理公司: | 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) 37264 | 代理人: | 王晓晓 |
| 地址: | 266000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 软骨素 奇数 寡糖 单体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种软骨素奇数寡糖单体的制备方法,其特征在于,所述软骨素奇数寡糖单体的结构式如下所示:
其中所述n=0~7,所述R为铵根离子或金属离子;
所述制备方法包括以下步骤:
(1)软骨素的制备:将硫酸软骨素溶解在无水二甲基亚砜和无水吡啶中,再加入苯并四甲酸和三氧化二锑,在氮气保护下100~130℃反应2~3h,冷却后加入碳酸氢钠水溶液终止反应,反应物经透析,减压浓缩后冷冻干燥获得脱去硫酸基团的大分子量软骨素;
(2)酸降解:取步骤(1)的大分子量软骨素完全溶解在水中,再加入稀酸溶液进行水解反应或加入氢型阳离子交换树脂进行水浴反应,反应液冷却至室温后用碱性溶液调节pH值至6.5~7.5,再加入有机溶剂进行沉淀,离心后的上清液进行减压浓缩后得到干燥软骨素寡糖混合物;所述稀酸溶液的水解反应温度为40℃~100℃,水解反应时间为0.5h~5h;所述氢型阳离子交换树脂的水浴反应温度为50℃~90℃,水浴反应时间为1h~8h;
(3)凝胶柱分离:取步骤(2)的干燥软骨素寡糖混合物完全溶解在水中,用凝胶色谱柱进行分离,用盐溶液洗脱,示差检测器在线检测,按照洗脱峰收集浓缩后冷冻干燥,获得所述软骨素奇数寡糖单体,所述凝胶色谱柱为Bio Gel P4、Superdex 30,Bio Gel P10、BioGel P6和Bio Gel P2中的至少一种;所述盐溶液为乙酸铵、水和碳酸氢铵中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的软骨素奇数寡糖单体的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中加入的稀酸溶液的体积用量为软骨素质量的5~20倍;所述稀酸溶液为盐酸、硫酸、硝酸、醋酸、甲酸、草酸、柠檬酸和三氟乙酸中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的软骨素奇数寡糖单体的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中加入的氢型阳离子交换树脂与软骨素的质量比为1~20∶1;所述氢型阳离子交换树脂为732、717、734、D001、D002和D61型强阳离子交换树脂中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的软骨素奇数寡糖单体的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中的碱性溶液为氨水、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠和碳酸氢钠中的至少一种;所述有机溶剂为甲醇、无水乙醇、丙酮和异丙醇中的至少一种;所述有机溶剂与反应液的体积比为3~7∶1。
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