[发明专利]miRNA3926-1基因作为胰腺癌诊断和疗效标志物的应用

说明书

本发明公开了miRNA3926‑1基因作为胰腺癌诊断和疗效标志物的应用，属于生物和疾病诊断领域。该基因标志物核苷酸相对拷贝数与胰腺癌发生率正相关，与胰腺癌患者治疗后的生存期呈负相关。本发明还涉及miRNA3926‑1抑制剂以及血液组织和胰腺癌组织样本中检测miRNA3926‑1的试剂盒、方法和应用。目前市面上没有针对miRNA3926‑1分子检测的应用，也没有针对miRNA3926‑1分子的抑制剂。本发明为肿瘤尤其是胰腺癌的早期诊断及预后治疗和miRNA3926‑1分子的抑制剂开发奠定了坚实的基础，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物和疾病诊断领域，涉及miRNA3926-1基因作为胰腺癌诊断和疗效标志物以及在检测试剂盒中的应用。

背景技术

肿瘤是世界上导致患者死亡的重大疾病。其发病机制复杂，已成为严重威胁人类健康的主要问题，其发病率和死亡率成逐年上升的趋势。目前我国癌症发病率和死亡率已经居于世界第一位。胰腺癌是一种恶性程度很高，诊断和治疗都很困难的消化道恶性肿瘤，称为万癌之王。一旦到了胰腺癌晚期，预后情况非常差，是预后最差的恶性肿瘤之一。胰腺癌早期的确诊率不高，治愈率低，目前尚未有较好治疗药物。胰腺癌的病因尚不十分清楚，涉及到多种基因异常，其发展是多因素的调控过程。

肿瘤分子标志物是反映肿瘤存在的物质。它们肿瘤组织中的含量异常于正常组织里的含量，它们的存在或量变可以提示肿瘤的性质，借以了解肿瘤的组织发生、细胞分化、细胞功能，以帮助肿瘤的诊断、分类、预后判断以及治疗指导。目前，microRNA(miRNA)已经成为一种新型的肿瘤特异性生物标志物。miRNA是较小(约22bp)的高度保守非编码RNA，在每种细胞类型中进行内源性表达。它通过碱基互补配对使靶标转录本沉默，从而起到调控基因表达的作用。miRNA可以由细胞分泌，在多种体液(包括血液、唾液等)中均可发现，已成为肿瘤的理想候选生物标志物，具有良好应用前景。迄今尚未见到miRNA3926-1及其抑制剂在胰腺癌研究中的相关报道。

发明内容

本发明公开了miRNA3926-1基因作为胰腺癌诊断和疗效标志物的应用。

本发明是通过以下技术方案来实现：

本发明公开的一种用于胰腺癌诊断和/或疗效检测的生物标志物，所述生物标志物为miRNA3926-1基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，其是通过TCGA(The CancerGenome Atlas)数据库结合Cox回归与lasso回归分析获得。

本发明还公开了上述miRNA3926-1基因作为胰腺癌诊断和/或疗效检测的生物标志物的应用，miRNA3926-1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。通过细胞转染将其在胰腺癌细胞系中过量表达，经过细胞增殖、转移等实验得到验证，同时20例结肠癌的肿瘤组织和癌旁组织对比研究确证。

优选地，miRNA3926-1基因的核苷酸相对拷贝数增高与胰腺癌发生呈正相关；同时，在治疗后miRNA3926-1基因相对拷贝数与患者生存期呈负相关。

优选地，所述的生物标志物miRNA3926-1基因的核苷酸相对拷贝数的降低包括引起的miRNA3926-1表达水平降低或/和靶标蛋白水平的升高或降低。

本发明还公开了上述的miRNA3926-1基因的抑制剂，该miRNA3926-1基因的抑制剂的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，经过化学合成制备。

本发明还公开了miRNA3926-1基因在制备用于诊断胰腺癌的试剂盒中的应用。诊断胰腺癌试剂盒中含有检测miRNA3926-1和内参RNA剪切体核苷酸U6(以下简称U6)引物对、逆转录cDNA引物序列等。

试剂盒检测miRNA3926-1的方法，包括RNA的提取步骤和cDNA合成，PCR扩增，扩增产物检查判断等。