[发明专利]一种藏羚羊绒成分的检测方法在审
申请号: | 201910880265.8 | 申请日: | 2019-09-18 |
公开(公告)号: | CN110501416A | 公开(公告)日: | 2019-11-26 |
发明(设计)人: | 费静;陈晓;刘敏华;蔡佳仕;吴娟 | 申请(专利权)人: | 上海海关工业品与原材料检测技术中心 |
主分类号: | G01N27/64 | 分类号: | G01N27/64;G01N1/28 |
代理公司: | 31104 上海华工专利事务所(普通合伙) | 代理人: | 赵孟琴;缪利明<国际申请>=<国际公布> |
地址: | 200135 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 特征峰 酶解 羊绒 电泳 分离纯化 羊绒制品 藏羚羊 质谱图 检测 条带 判定 蛋白 鉴别 回收 走私 观察 打击 | ||
本发明公开了一种藏羚羊绒成分的检测方法,该方法包括:步骤一:提取羊绒制品样品中的蛋白,通过电泳对其进行分离纯化,回收位于约47KD的条带,然后进行酶解,获得酶解后的溶液;步骤二、使用MALDI‑TOF‑MS对酶解后的溶液进行特征峰检测,观察质谱图是否出现m/z 2606的特征峰,根据m/z 2606的特征峰的有无判定样品中是否含有藏羚羊绒成分。本发明的方法鉴别藏羚羊绒成分的特异性好,结果可靠客观,对于保护藏羚羊、打击违法走私活动具有非常积极的作用。
技术领域
本发明属于生物检测领域,具体地说,是关于一种藏羚羊绒成分的检测方法。
背景技术
藏羚羊(Pantholops hodgsonii)是我国特有的珍稀物种之一,生活在高寒的可可西里地区,被誉为“高原的精灵”。该物种为了抵御严寒,全身覆盖厚厚的毛,隐藏于长毛之下紧贴皮肤的底绒,非常的细软,直径只有10-12μm,是特种动物纤维中最细的。该绒保暖性能极佳,被称为“shahtoosh”,波斯语羊绒之王的意思。使用该绒制成的披肩,过去是印度有钱人家给女儿置办的嫁妆,现如今在西方是财富和地位的象征,在地下市场上售价达5000-20000美金一条。尽管藏羚羊被列入《濒危野生动植物种国际贸易公约》,也是我国的一级保护动物,在高额利益的驱使下,还是有不法分子铤而走险,猎杀藏羚羊取其皮毛。
一头成年的藏羚羊仅能提供150克左右的shahtoosh,而一条披肩,往往要消耗300-400克藏羚羊生绒,即3-4头藏羚羊的生命。正是国际市场的追捧和高额利益的驱使,藏羚羊的生命受到了严重的威胁。在鼎盛时期青藏高原上的藏羚羊数目达100万头左右,在20世纪最后20年遭大量偷猎,最低时仅剩余约7万头。经过这几年中国政府和国际社会的共同努力,这个数字有所回升。但是按照每年海关缴获的shahtoosh披肩数目来看,粗略估计每年仍有20000头藏羚羊惨死在猎枪之下。按国家野生动物保护法,猎杀和走私藏羚羊3头即属重大案件,应从重处理,追究刑事责任。近年来,不法分子已经不再将整张羊皮走私出境,而是采取瞒报夹带等更加隐蔽复杂的手法,将藏羚羊绒藏在其他物品中,或混在羊绒、羊毛制品中,将藏羚羊绒运至印度、尼泊尔等地区进行加工,再卖到欧美市场。
目前,藏羚羊绒的鉴别,主要依靠显微镜放大后对外观形态的观察。一般来说,藏羚羊绒的直径比羊绒、细羊毛要细,鳞片呈环状,比较稀疏,与羊绒的表观较为相似。
因此,需要有一种更客观的方法,能够准确地鉴别藏羚羊绒成分,从而对保护藏羚羊、打击违法走私活动起到积极的作用。
发明内容
本发明的目的是提供一种藏羚羊绒成分的检测方法,以解决现有的藏羚羊绒成分的检测方法存在主观问题、准确性低的问题。
为实现上述目的,本发明采用以下技术方案:
一种藏羚羊绒成分的检测方法,该方法包括:
步骤一:提取羊绒制品样品中的蛋白,通过电泳对其进行分离纯化,回收位于约47KD的条带,然后进行酶解,获得酶解后的溶液;
步骤二、使用MALDI-TOF-MS对酶解后的溶液进行特征峰检测,观察质谱图是否出现m/z 2606的特征峰,根据m/z 2606的特征峰的有无判定样品中是否含有藏羚羊绒成分。
根据本发明,步骤一的提取羊绒制品样品的蛋白,包括如下步骤:
A、先将羊绒制品样品磨碎,放入离心管中;
B、往离心管中加入提取液,并混匀;
C、将离心管置入热盖温控装置于95℃30min;
D、取出待室温后,加入碘乙酰胺使溶液浓度调整至100mM;
E、加入DTT溶液终止反应,离心,取上清,备用。
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