[发明专利]一种三苯甲烷染料及其代谢产物高选择性固相微萃取探针的制备方法与应用

权利要求书

1.一种三苯甲烷染料及其代谢产物高选择性固相微萃取探针，所述三苯甲烷染料包括孔雀石绿、结晶紫，其代谢产物分别对应为隐色孔雀石绿、隐色结晶紫，其特征在于，包括带有尖端的金属基质和通过化学键合的方式涂覆到基质上的涂层材料，其制备方法包括以下步骤：

1)将金属基质浸入到含有高锰酸钾和重铬酸钾的硫酸溶液中，加热回流1～5d，然后放入氢氧化钠溶液中加热回流1～5d，用甲醇清洗，氮气吹干；

2)再放入到含有三甲氧基(4-乙烯基苯基)硅烷的无水DMF中，无水条件下加热回流1～24h，反应结束后用甲醇清洗，接着放入到含有焦亚硫酸钠的溶液中，恒温反应12～48h,最后再用甲醇清洗，氮气吹干，得到修饰好的SPME探针。

2.根据权利要求1所述的三苯甲烷染料及其代谢产物高选择性固相微萃取探针，其特征在于，金属基质为金属钨，尖端直径在0.05～0.15μm范围。

3.根据权利要求1或2所述的三苯甲烷染料及其代谢产物高选择性固相微萃取探针，其特征在于，步骤1)中，高锰酸钾的浓度为20～50mg/mL，重铬酸钾的浓度为10～30mg/mL，硫酸的浓度为20～50wt％。

4.根据权利要求1或2所述的三苯甲烷染料及其代谢产物高选择性固相微萃取探针，其特征在于，所述的焦亚硫酸钠的溶液，pH值为6.5。

5.权利要求1-4中任意一项权利要求所述三苯甲烷染料及其代谢产物高选择性固相微萃取探针的应用，其特征在于，用于生物体内痕量三苯甲烷染料及其代谢产物原位、微观分析，在常压敞开的条件下，直接对探针中富集的化合物进行电喷雾质谱分析；所述三苯甲烷染料包括孔雀石绿、结晶紫，其代谢产物分别对应为隐色孔雀石绿、隐色结晶紫。

6.根据权利要求5所述的三苯甲烷染料及其代谢产物高选择性固相微萃取探针的应用，其特征在于，所述固相微萃取探针对样品中的目标物进行萃取富集后，直接进行固相微萃取探针电喷雾离子源-质谱分析。

7.根据权利要求6所述的三苯甲烷染料及其代谢产物高选择性固相微萃取探针的应用，其特征在于，所述的固相微萃取探针尖端对准质谱入口并固定于距离质谱入口处3-8mm的支架上，在固相微萃取探针上施加2.0-4.0KV的高压电场进行电喷雾离子源-质谱分析。