[发明专利]具有抗肿瘤活性的山楂和山楂叶的发酵组合物及其应用

权利要求书

1.一种具有抗肿瘤活性的山楂和山楂叶的发酵组合物，其特征在于，其制备过程如下：

(1)挑选成熟山楂，要求无霉烂果实，清洗洗净山楂果表面的污物，沥干水分；将洗好的块备用；

(2)挑选新鲜的山楂叶，要求无烂叶；将新鲜的山楂叶洗净烘干粉粹成山楂叶粉备用；

(3)将纯净水：山楂果按1:1混合打浆制备山楂果浆；在山楂果浆加入10％质量分数的山楂叶粉，混匀，再使用0.1％果胶酶52℃酶解2小时；得到山楂和山楂叶的混悬液；

(4)将山楂和山楂叶的混悬液加入1％质量分数葡萄糖,1-2％质量分数的低聚木糖，5％体积比的保加利亚乳杆菌液、3-5％体积比的莱氏曼氏乳杆菌液、5-8％体积比的裂褶菌液进行微生物发酵,发酵时间10天、发酵温度30℃，100-120r/min；

(5)得到山楂和山楂叶的发酵组合物进行絮凝沉淀物过滤，杀菌，在4℃条件下密封保存；

菌种的活化过程为：

保加利亚乳杆菌：取保加利亚乳杆菌接种到MRS固体培养基中划线，37℃培养24h；挑取平板中长势较好的单菌落接种至MRS液体培养基中活化，培养24h后即可作为5*10⁷CFU/ml保加利亚乳杆菌种子液，培养条件：30℃，200r/min；即可作为保加利亚乳杆菌种子液；

莱氏曼氏乳杆菌：取莱氏曼氏乳杆菌接种到MRS固体培养基中划线，37℃培养24h；挑取平板中长势较好的单菌落接种至MRS液体培养基中活化，培养24h后即可作为5*10⁷CFU/ml莱氏曼氏乳杆菌种子液，培养条件：30℃，200r/min；即可作为莱氏曼氏乳杆菌种子液；

裂褶菌：取裂褶菌在裂褶菌综合固体培养基，27℃培养30天；使用接种铲从裂褶菌的培养基上挖取5mm菌块接种质量分数10％至裂褶菌液体培养基中，所述裂褶菌综合固体培养基配方为：20％马铃薯汁1L、葡萄糖20g/L、KH₂PO₄ 3g/L、MgSO₄ 1.5g/L、琼脂15g，pH 6；裂褶菌液体培养基：葡萄糖20g/L、玉米粉50g/L、KH₂PO₄ 3g/L、MgSO₄ 1.5g/L、培养条件：27℃，120r/min；培养10天后即可作为1*10⁷CFU/ml裂褶菌种子液。

2.权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的山楂和山楂叶的发酵组合物，其特征在于：

所述保加利亚乳杆菌，拉丁名称：Lactobacillus delbrueckii subsp.Bularicus，可购自广东省微生物研究所专利菌种保藏中心，菌种编号为GIM1.155，革兰氏阳性杆菌；

所述裂褶菌，拉丁名称：Schizophyllum commune Fr，可购自广东省微生物研究所专利菌种保藏中心，菌种编号为GIM5.44；

所述莱氏曼氏乳杆菌，拉丁名称：Lactobacillus leichmannii，可购自广东省微生物研究所专利菌种保藏中心，菌种编号为GIM1.823。

3.权利要求1或2所述的具有抗肿瘤活性的山楂和山楂叶的发酵组合物在制备抗肿瘤产品中的应用。