[发明专利]一种高效液相色谱法测定阿普唑仑片有关物质的方法

说明书

本发明属于药物检测领域，具体涉及一种高效液相色谱法测定阿普唑仑片有关物质的方法。该方法的流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为磷酸二氢钾溶液，所述流动相B为乙腈，通过采用特定的梯度洗脱方式，可在高效液相色谱图中将阿普唑仑片中有关物质(包含阿普唑仑和至少5种常见杂质)分离检测出来，通过对条件的优化，使得对各组分检测的灵敏性及其含量的准确性进一步得到提升。本方法专属性好、分析速度快、重现性高，便于对阿普唑仑片的质量检测与监控，有利于阿普唑仑的安全推广与应用。

技术领域

本发明涉及药物检测领域，具体涉及一种高效液相色谱法测定阿普唑仑片有关物质的方法。

背景技术

阿普唑仑(Alprazolam)是一种新的BDZ类药物，具有抗焦虑、抗抑郁、镇静、催眠、抗惊厥及肌肉松弛等作用，可用于治疗焦虑症、抑郁症、失眠等，其分子作用靶点为：GABA-Areceptor，具有同地西泮相似的药理作用，但不良反应如倦乏、头晕、口干、恶心等较地西泮轻。阿普唑仑片的原研商为PHARMACIA AND UPJOHN，1981年商品名为XANAX的1mg片剂在美国首先上市，其在国内有62个批准文号，但中国药典中，并未对有关物质进行规定。

然而，阿普唑仑片在作为药品时容易产生杂质，已知有5个，分别为杂质A、三唑仑、7-氯-1,3-二氢-5-苯基-2H-1,4-苯并二氮杂-2-酮、7-氯-1,3-二氢-5-苯基-2H-1,4-苯并二氮杂-2-硫酮、杂质E。目前，现有技术未公开阿普唑仑片5个已知杂质的检测方法，因此需提供一种测定阿普唑仑片有关物质的方法。

发明内容

目前，现有技术未公开对阿普唑仑片中5个已知杂质的检测方法，为了克服现有技术的缺陷，本发明提供了一种高效液相色谱法测定阿普唑仑片有关物质的方法。

具体而言，本发明提供了如下技术方案：

一种高效液相色谱法测定阿普唑仑片有关物质的方法，流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为磷酸二氢钾溶液，所述流动相B为乙腈，采用梯度洗脱，以所述流动相的总体积为100％计，

在第0～10min，所述流动相A的体积由75％递减为70％，所述流动相B的体积由25％递增为30％；

在第10～30min，所述流动相A的体积为70％，所述流动相B的体积为30％；

在第30～60min，所述流动相A的体积由70％递减为50％，所述流动相B的体积由30％递增为50％。

本发明发现，采用高效液相色谱法对阿普唑仑片中容易出现的杂质进行检测时，流动相的选择和洗脱方式对杂质的分离都有较大的影响，当采用固定比例的流动相A和流动相B进行检测时，难以将上述杂质很好的分离，且分析时间长，经过大量尝试发现，当采用上述方法进行梯度洗脱时，可以很好地将阿普唑仑片中容易出现的杂质区分开来。

本发明所述的阿普唑仑片有关物质包括阿普唑仑及杂质，所述杂质对照品为选自杂质A(式1)、三唑仑(式2)、7-氯-1,3-二氢-5-苯基-2H-1,4-苯并二氮杂-2-酮(式3)、7-氯-1,3-二氢-5-苯基-2H-1,4-苯并二氮杂-2-硫酮(式4)、杂质E(式5)中的一种或一种以上混合物。

通过本发明中的方法可同时将上述5个已知杂质与阿普唑仑分离开来。

为了进一步提升检测的准确性和灵敏性，本发明对高效液相色谱法的其他条件进行了优化，得到如下优选方案(将各优选方案组合可得本发明较佳实施例)：

作为优选，所述磷酸二氢钾A溶液的浓度为1.1～1.7g/L，优选为1.4g/L。

作为优选，采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂。